Plasmide CRISPR/Cas9 KO SNRPC (h): sc-404002

Présentation

SNRPC code un composant central des protéines Sm du petit ribonucléoprotéine nucléaire U1 (snRNP), un sous-complexe essentiel du spliceosome qui reconnaît les sites d’épissage 5′ et favorise un épissage précis des pré-ARNm. En contribuant à l’assemblage des particules snRNP et à la stabilisation des interactions entre l’ARNsn U1 et les protéines, SNRPC soutient la biogenèse du spliceosome, le traitement co-transcriptionnel des ARN et les programmes d’expression génique en aval. La perturbation des composants du spliceosome, dont SNRPC, est associée à une dysrégulation étendue de l’épissage pouvant affecter le contrôle du cycle cellulaire, les réponses aux dommages de l’ADN et les voies de différenciation. Une fonction altérée du spliceosome a été reliée à diverses maladies humaines, en particulier des cancers et des maladies héréditaires dues à un traitement anormal des ARN.

Le plasmide CRISPR/Cas9 KO SNRPC (h) est un ensemble de plasmides conçus pour la disruption ciblée du gène SNRPC dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide co-exprime un ARN guide unique (sgRNA) ciblant un site distinct au sein du SNRPC, ainsi que la nucléase Cas9 de Streptococcus pyogenes. Les plasmides codent également pour la GFP, ce qui permet l'identification par fluorescence et l'enrichissement des cellules transfectées avec succès par microscopie à fluorescence ou cytométrie en flux.

La conception multi-guide augmente la probabilité de générer des insertions ou des délétions (indels) qui perturbent le cadre de lecture ouvert SNRPC à la suite de la formation de cassures double brin médiées par Cas9. Les cassures d'ADN introduites par le système CRISPR/Cas9 sont réparées par des voies endogènes de jonction non homologue (NHEJ), ce qui entraîne fréquemment des mutations par décalage du cadre de lecture qui suppriment l'expression de la protéine SNRPC.

Ce système de knock-out CRISPR permet la génération efficace de modèles cellulaires déficients en SNRPC pour l'étude de la signalisation de SNRPC, les études de génomique fonctionnelle, la recherche en biologie du cancer et l'évaluation des réponses thérapeutiques dans des lignées cellulaires humaines.

Caractéristiques principales

• sgRNA ciblant le ou les exons de SNRPC essentiels à la fonction de SNRPC
  Co-expression de SpCas9 et de sgRNA à partir d'un seul plasmide pour une administration simplifiée
  Rapporteur GFP pour l'identification des cellules transfectées
  Pool de plasmides ciblant plusieurs sites génomiques de SNRPC pour améliorer l'efficacité du knock-out
  Compatible avec l'administration par transfection

Variantes de conception

CRISPR +/- HDR

• Les gRNA codés par le SNRPC plasmide CRISPR/Cas9 KO (h) et le SNRPC plasmide CRISPR/Cas9 KO (h2) ciblent des sites distincts au sein du locus SNRPC. Une ou les deux conceptions de ciblage peuvent être disponibles. Voir les produits associés pour connaître la disponibilité.
  Les constructions donneuses HDR codées par le SNRPC plasmide HDR (h) et le SNRPC (h2) contiennent une cassette de résistance à la puromycine et un rapporteur RFP flanqué de bras d'homologie SNRPC pour permettre la réparation dirigée par homologie au niveau de sites cibles SNRPC définis correspondant aux conceptions CRISPR/Cas9 KO. La disponibilité des donneurs HDR peut varier. Voir les produits associés pour connaître la disponibilité.

Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.