Plásmido Doble Nickase (h) SNM1A: sc-411393-NIC
- Especies Diana: human
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- El Plásmido Double Nickase (h)SNM1A consisten en un par de plásmidos cada uno codificando una nucleasa Cas9 mutada D10A y una guia de ARN de 20 nucleótidos (gRNA) diseñados para una mayor especificidad que el homologo CRISPR/Cas9 KO
- Las secuencias de gRNA tienen una diferencia de unas 20 pb para permitir un corte doble mediado por Cas9 en el ADN que imita el doble corte
- Uno de los plásmidos contiene el gen de resistencia a puromicina para la selección y el otro el marcado GFP para confirmar visualmente la transfección
- El plásmido de doble nickasa SNM1A (h) y el plásmido de doble nickasa SNM1A (h2) codifican diseños distintos de pares de gRNA dirigidos a DCLRE1A. Puede que esté disponible uno o ambos diseños
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
Plásmido Doble Nickase (h) SNM1A | sc-411393-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plásmido Doble Nickase (h2) SNM1A | sc-411393-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
DCLRE1A codifica SNM1A, una exonucleasa 5′–3′ de la familia de las metalo-β-lactamasas que favorece la reparación de los entrecruzamientos interhebra del ADN y de otras lesiones que detienen las horquillas de replicación. SNM1A actúa aguas abajo de la vía de la anemia de Fanconi y coopera con endonucleasas específicas de estructura para procesar intermediarios de ADN derivados de entrecruzamientos, apoyando la reparación acoplada a la replicación y la estabilidad del genoma. Al limitar el estrés replicativo y las aberraciones cromosómicas, SNM1A contribuye a las respuestas celulares al daño genotóxico y al mantenimiento de la capacidad proliferativa. La actividad alterada de DCLRE1A/SNM1A se ha relacionado con una menor tolerancia al daño del ADN y con susceptibilidad a fenotipos de inestabilidad genómica relevantes para la biología del cáncer y trastornos hereditarios de reparación del ADN.
SNM1A El plásmido de doble nicasa (h) consiste en un par de plásmidos emparejados diseñados para la edición de alta especificidad del locus DCLRE1A en líneas celulares human. Cada plásmido expresa una nicasa Cas9 D10A y un ARN guía específico (sgRNA) dirigido a cadenas de ADN opuestas dentro de DCLRE1A. Cuando se dirigen a sitios adyacentes en cadenas de ADN opuestas, las dos nicasas generan cortes en cadena simple desplazados que, juntos, producen una rotura de doble cadena escalonada, lo que requiere una actividad coordinada sobre el objetivo por parte de ambas guías. La rotura de ADN resultante se resuelve mediante vías de reparación celular endógenas, más comúnmente a través de la unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que da lugar a inserciones o deleciones que alteran la función de DCLRE1A. Al requerir la participación de dos ARN guía en el locus diana, el enfoque de doble corte mejora la especificidad de la edición y proporciona una estrategia CRISPR complementaria para aplicaciones en las que se desea un control adicional sobre la precisión de la orientación.
Para facilitar la identificación eficiente de las células editadas, un plásmido codifica GFP para la visualización fluorescente de las poblaciones transfectadas, mientras que el plásmido complementario lleva un gen de resistencia a la puromicina para la selección con antibióticos. En conjunto, estas características facilitan el enriquecimiento eficiente de las poblaciones cotransfectadas y simplifican la validación de los clones con DCLRE1A alterado.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.