SNAT2 CRISPR/Cas9 KO Plasmid (m): sc-426728
- Zielspezies: mouse
- 20 µg transfektionsfertige, aufgereinigte Plasmid DNA; geeignet für 20 Transfektionen
- SNAT2 Das CRISPR/Cas9-Knockout (KO)-Plasmid (m) ist ein Pool von Plasmiden, von denen jedes für die Cas9-Nuklease und eine zielspezifische 20-nt-Guide-RNA (gRNA) kodiert, die für maximale Knockout-Effizienz unter Verwendung von Sequenzen aus der GeCKO v2-Bibliothek entwickelt wurde
- gRNA-Sequenzen lenken Cas9 so, dass es ortsspezifische Doppelstrangbrüche (DSBs) im SNAT2-Genomlokus induziert, was zu einem Gen-Knockout durch nicht-homologe Endverknüpfung (NHEJ) führt
- Die Puromycin-Resistenz- und RFP-Gene werden von LoxP-Stellen flankiert, was die Entfernung der Selektionsmarker mittels Cre-Rekombinase (Cre-Vektor: sc-418923) nach der Etablierung stabiler Knockout-Zelllinien ermöglicht
- Nach der Transfektion kann die Effizienz des Gen-Knockouts per Western Blot oder histologisch mit folgendem Antikörper überprüft werden: SNAT2: sc-166366
Bestellinformation
| Produkt | Katalog # | EINHEIT | Preis | ANZAHL | Favoriten | |
SNAT2 CRISPR/Cas9 KO Plasmid (m) | sc-426728 | 20 µg | $397.00 |
Übersicht
Slc38a2 kodiert den mausstämmigen, natriumgekoppelten Transporter für neutrale Aminosäuren SNAT2 (SLC38A2), einen Transporter des System A, der die Aufnahme kleiner neutraler Aminosäuren wie Glutamin, Alanin und Serin auf Na⁺-abhängige Weise vermittelt. SNAT2 unterstützt die zelluläre Nährstoffsensorik und metabolische Anpassung und verknüpft die Verfügbarkeit von Aminosäuren mit stressresponsiven Programmen, einschließlich der integrierten Stressantwort/ATF4-Achse, sowie der nachgeschalteten Regulation der mTORC1-Signalübertragung. Durch die Prägung intrazellulärer Aminosäurepools beeinflusst SNAT2 das Redoxgleichgewicht, die Bioenergetik und die Proteinsynthese in proliferierenden und differenzierenden Zellen. Fehlregulierter Aminosäuretransport und Glutaminverwertung werden häufig in Zusammenhängen wie metabolischem Remodeling, Immunzellfunktion und Krebsbiologie untersucht, wodurch Slc38a2 ein nützlicher Knotenpunkt ist, um nährstoffabhängige Phänotypen in Mausmodellen zu untersuchen.
Das SNAT2 CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (m) ist ein Pool von Plasmiden, die für die gezielte Disruption des Slc38a2-Gens in mouse-Zelllinien entwickelt wurden. Jedes Plasmid koexprimiert eine einzigartige Single-Guide-RNA (sgRNA), die auf eine bestimmte Stelle innerhalb des Slc38a2-Gens abzielt, zusammen mit der Streptococcus pyogenes Cas9-Nuklease. Die Plasmide kodieren zudem für GFP, was die fluoreszente Identifizierung und Anreicherung erfolgreich transfizierter Zellen mittels Fluoreszenzmikroskopie oder Durchflusszytometrie ermöglicht.
Das Multi-Guide-Design erhöht die Wahrscheinlichkeit, dass Insertionen oder Deletionen (Indels) entstehen, die den offenen Leserahmen von Slc38a2 nach der Cas9-vermittelten Bildung von Doppelstrangbrüchen unterbrechen. Durch das CRISPR/Cas9-System verursachte DNA-Brüche werden über endogene NHEJ-Wege (Non-Homologous End Joining) repariert, was häufig zu Frameshift-Mutationen führt, die die SNAT2-Proteinexpression aufheben.
Dieses CRISPR-Knockout-System ermöglicht die effiziente Erzeugung von Slc38a2-defizienten Zellmodellen zur Untersuchung der SNAT2-Signalübertragung, für funktionelle Genomstudien, in der Krebsbiologieforschung sowie zur Bewertung therapeutischer Reaktionen in menschlichen Zelllinien.
Hauptmerkmale
- sgRNAs, die auf Slc38a2-Exone abzielen, die für die SNAT2-Funktion entscheidend sind
Ko-Expression von SpCas9 und sgRNA aus einem einzigen Plasmid zur vereinfachten Verabreichung
GFP-Reporter zur Identifizierung transfizierter Zellen
Pool von Plasmiden, die auf mehrere Slc38a2-Genomstellen abzielen, um die Knockout-Effizienz zu verbessern
Kompatibel mit der Verabreichung durch Transfektion
Designvarianten
CRISPRs +/- HDRs
- gRNAs, die vom SNAT2 CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (m) und vom SNAT2 CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (m2) kodiert werden, zielen auf unterschiedliche Stellen innerhalb des Slc38a2-Lokus ab. Es kann ein oder beide Targeting-Designs verfügbar sein. Siehe „Verwandte Produkte“ für Verfügbarkeit.
HDR-Donorkonstrukte, kodiert durch das SNAT2 HDR-Plasmid (m) und SNAT2 HDR-Plasmid (m2) kodiert, enthalten eine Puromycin-Resistenzkassette und einen RFP-Reporter, flankiert von Slc38a2-Homologiearmen, um die homologe Reparatur an definierten Slc38a2-Zielstellen entsprechend den CRISPR/Cas9-KO-Designs zu unterstützen. Die Verfügbarkeit von HDR-Donoren kann variieren. Siehe „Verwandte Produkte“ für Verfügbarkeit.
Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.