Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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Plasmide Double Nickase (m) SNAP 25: sc-423048-NIC
- Espèces cibles: mouse
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (m) SNAP 25 correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide SNAP 25 Double Nickase (m) et le plasmide SNAP 25 Double Nickase (m2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant Snap25. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
- Après transfection, l'efficacité de knockout de gène peut être évaluée par WB, IF ou IHC en utilisant l'anticorps: SNAP 25 Antibody (SP12): sc-20038
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (m) SNAP 25 | sc-423048-NIC | 20 µg | $410.00 |
Snap25 code pour la protéine 25 associée aux synaptosomes (SNAP25), un composant central du complexe neuronal SNARE qui assure l’arrimage des vésicules synaptiques et la fusion membranaire déclenchée par le calcium lors de la libération des neurotransmetteurs. En s’associant à la syntaxine et à VAMP/synaptobrévine, SNAP25 régule l’exocytose présynaptique, la plasticité synaptique à court terme et le recyclage des vésicules dépendant de l’activité dans les circuits excitateurs et inhibiteurs. La signalisation dépendante de SNAP25 recoupe des voies qui contrôlent l’excitabilité neuronale et le développement des réseaux, faisant de Snap25 un locus largement utilisé pour explorer les mécanismes de la transmission synaptique dans des modèles murins. Une expression altérée de SNAP25 ou un dysfonctionnement des SNARE a été associée à des phénotypes neurodéveloppementaux et neuropsychiatriques dans des études génétiques et fonctionnelles, ce qui étaye sa pertinence pour la recherche sur les dysfonctionnements des circuits.
SNAP 25 Le plasmide double nickase (m) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus Snap25 dans les lignées cellulaires mouse. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de Snap25. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de Snap25. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de Snap25.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.