SMPDL3B CRISPR/Cas9 케이오 플라스미드 (m): sc-430315

개요

Smpdl3b는 세포막에 연관된 포스포디에스테라아제인 sphingomyelin phosphodiesterase acid-like 3B(SMPDL3B)를 암호화하며, 세포 표면에서 스핑고지질과 인지질 대사를 조절하는 데 관여하는 것으로 알려져 있습니다. SMPDL3B는 막 지질 조성과 수용체 조직화에 영향을 줌으로써 Toll-like receptor 신호전달, 대식세포 활성화 상태, 그리고 염증 반응의 항상성 유지 조절과 연관되어 보고되어 왔습니다. 마우스의 면역 및 신장 생물학에서는 SMPDL3B 활성의 변화가 선천면역 반응성과 족세포(podocyte) 기능의 변화와 연관되는 것으로 관찰되어, 지질 리모델링이 조직 손상과 염증에 연결될 수 있음을 시사합니다. 따라서 Smpdl3b는 지질 신호, 엔도리소좀(endolysosomal) 수송, 그리고 염증성·대사성 질환 모델에서 의미 있는 면역세포 표현형이 교차하는 경로에서 자주 연구됩니다.

SMPDL3B CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (m)는 mouse 세포주에서 Smpdl3b 유전자의 표적 파괴를 위해 설계된 플라스미드 풀입니다. 각 플라스미드는 Smpdl3b 유전자 내의 서로 다른 부위를 표적으로 하는 고유한 단일 가이드 RNA(sgRNA)와 Streptococcus pyogenes Cas9 뉴클레아제를 함께 발현합니다. 또한 이 플라스미드들은 GFP를 암호화하여, 형광 현미경이나 유세포 분석기를 통해 성공적으로 형질전환된 세포를 형광으로 식별하고 농축할 수 있게 합니다.

다중 가이드 설계는 Cas9에 의한 이중 가닥 절단 형성 후 Smpdl3b의 개방 독서 틀(ORF)을 파괴하는 삽입 또는 결실(indel)이 발생할 가능성을 높입니다. CRISPR/Cas9 시스템에 의해 유발된 DNA 절단은 내인성 비동종 말단 결합(NHEJ) 경로를 통해 복구되며, 이는 종종 SMPDL3B 단백질 발현을 소멸시키는 프레임 시프트 돌연변이를 초래합니다.

이 CRISPR 녹아웃 시스템은 SMPDL3B 신호 전달 연구, 기능 유전체학 연구, 암 생물학 연구 및 인간 세포주에서의 치료 반응 평가를 위한 Smpdl3b 결핍 세포 모델을 효율적으로 생성할 수 있게 합니다.

주요 특징

• SMPDL3B 기능에 중요한 Smpdl3b 엑손을 표적하는 sgRNA
  전달을 단순화하기 위해 단일 플라스미드에서 SpCas9 및 sgRNA의 공동 발현
  형질전환된 세포 식별을 위한 GFP 리포터
  녹아웃 효율 향상을 위해 여러 Smpdl3b 게놈 부위를 표적하는 플라스미드 풀
  형질전환을 통한 전달과 호환

설계 변형

CRISPRs +/- HDR

• SMPDL3B CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (m) 및 SMPDL3B CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (m2)에 의해 암호화되는 gRNA는 Smpdl3b 유전자좌 내의 서로 다른 부위를 표적화합니다. 표적화 설계 중 하나 또는 둘 다 이용 가능할 수 있습니다. 구입 가능 여부는 관련 제품을 참조하십시오.
  SMPDL3B HDR 플라스미드 (m) 및 SMPDL3B HDR 플라스미드 (m2)에 의해 암호화되는
  HDR 기증자 컨스트럭트는 푸로마이신 내성 카세트와 RFP 리포터를 포함하며, 이는 CRISPR/Cas9 KO 설계에 해당하는 정의된 Smpdl3b 표적 부위에서의 상동성 유도 복구를 지원하기 위해 Smpdl3b 상동성 암으로 둘러싸여 있습니다. HDR 기증자의 재고 여부는 달라질 수 있습니다. 재고 여부는 관련 제품을 참조하십시오.

연구용으로만 사용하세요. 진단 또는 치료용이 아닙니다.