SMG8 더블 틈내기효소 플라스미드 (h): sc-408902-NIC

SMG8는 UPF1의 인산화와 무의미 매개 mRNA 분해(nonsense-mediated mRNA decay, NMD)의 진행을 조절하는 SMG1 키나아제 복합체(SMG1–SMG8–SMG9)의 핵심 조절 서브유닛을 암호화합니다. SMG8는 NMD 효율을 조절하고 번역 종결 감시와의 연계를 매개함으로써 전사체의 품질을 유지하고 RNA 항상성, 스트레스 반응, 단백질 항상성(프로테오스타시스)에 영향을 미칩니다. SMG8 연관 복합체 구성요소를 포함한 NMD 조절 인자의 교란은 비정상적이거나 조절성 mRNA의 안정성을 변화시켜, 세포 성장과 분화를 관장하는 경로에 하위 수준의 영향을 미칠 수 있습니다. 그 결과 SMG8는 유전자 발현 조절, RNA 분해 경로의 재배선, 질병과 관련된 전사체 조절 이상이라는 맥락에서 자주 연구됩니다.

SMG8 더블 니카제 플라스미드(h)는 human 세포주 내 SMG8 유전자좌의 고특이성 편집을 위해 설계된 쌍을 이루는 플라스미드로 구성됩니다. 각 플라스미드는 Cas9 D10A 니카아제와 SMG8 내의 반대 DNA 가닥을 표적으로 하는 고유한 sgRNA를 발현합니다. 반대 DNA 가닥의 인접 부위로 유도될 때, 두 니카아제는 서로 어긋난 단일 가닥 절단 부위를 생성하며, 이는 함께 엇갈린 이중 가닥 절단을 유발하여 두 가이드의 조화된 표적 활성을 필요로 합니다. 이렇게 생성된 DNA 절단은 내인성 세포 복구 경로, 특히 비동형 말단 결합(NHEJ)을 통해 해결되며, 이는 SMG8의 기능을 방해하는 삽입 또는 결실을 초래한다. 표적 부위에서 이중 sgRNA 결합을 요구함으로써, 이중 니킹 접근법은 편집 특이성을 향상시키고 표적 정밀도에 대한 추가적인 제어가 필요한 응용을 위한 보완적인 CRISPR 전략을 제공한다.

편집된 세포를 효율적으로 식별할 수 있도록, 한 플라스미드는 형광 시각화를 위한 GFP를 발현하며, 다른 플라스미드는 항생제 선별을 위한 푸로마이신 내성 유전자를 포함하고 있습니다. 이러한 기능들은 공동 형질 도입된 세포 집단의 효율적인 농축을 지원하며, SMG8 기능이 손상된 클론의 검증을 단순화합니다.

연구용으로만 사용하세요. 진단 또는 치료용이 아닙니다.