Plasmide Double Nickase (m) Smarcad1: sc-420234-NIC
- Espèces cibles: mouse
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (m) Smarcad1 correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide Smarcad1 Double Nickase (m) et le plasmide Smarcad1 Double Nickase (m2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant Smarcad1. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (m) Smarcad1 | sc-420234-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plasmide Double Nickase (m2) Smarcad1 | sc-420234-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
Smarcad1 chez la souris code un facteur de remodelage de la chromatine dépendant de l’ATP, de la famille SNF2, qui contribue à réguler la dynamique des nucléosomes lors de la réplication et de la réparation de l’ADN. SMARCAD1 participe au réassemblage de la chromatine au niveau des fourches de réplication, favorise la résection des extrémités aux cassures double brin et soutient la recombinaison homologue tout en limitant les événements de recombinaison aberrants. Par ses interactions avec des complexes associés à la réplication et à la réparation, il influence la régulation transcriptionnelle, le maintien de l’hétérochromatine et la stabilité du génome. Une altération de la fonction de SMARCAD1 a été associée à des défauts des réponses aux dommages de l’ADN et de la régulation épigénétique, ce qui en fait une cible pertinente pour l’étude de l’instabilité génomique, de phénotypes développementaux et de la dérégulation de la chromatine associée au cancer.
Smarcad1 Le plasmide double nickase (m) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus Smarcad1 dans les lignées cellulaires mouse. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de Smarcad1. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de Smarcad1. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de Smarcad1.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.