SMARCA4/Brg1 Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-400168-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- SMARCA4/Brg1O plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase SMARCA4/Brg1 (h) e o Plasmídeo Double Nickase SMARCA4/Brg1 (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para SMARCA4. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:SMARCA4/Brg1 Anticorpo (G-7): sc-17796
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
SMARCA4/Brg1 Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-400168-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
SMARCA4/Brg1 Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-400168-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
SMARCA4 (Brg1) codifica o núcleo catalítico ATPase do complexo de remodelação de cromatina SWI/SNF (BAF), que reposiciona nucleossomos para regular programas transcricionais que controlam a especificação de linhagem, a progressão do ciclo celular, as respostas a danos no DNA e a diferenciação. Por meio da remodelação de cromatina dependente de ATP, SMARCA4 influencia a acessibilidade de enhancers e coopera com fatores de transcrição específicos de sequência para modular a expressão gênica em vias de desenvolvimento e de resposta ao estresse. A disrupção de SMARCA4 perturba o estado da cromatina e a regulação do genoma, e alterações recorrentes estão associadas a controle epigenético aberrante e a circuitos transcricionais oncogênicos em múltiplos contextos tumorais. Como regulador central da cromatina, SMARCA4 é amplamente estudado em acessibilidade de cromatina, mapeamento de dependências transcricionais e redes de letalidade sintética envolvendo subunidades do SWI/SNF e repressão por Polycomb.
SMARCA4/Brg1 O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus SMARCA4 em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de SMARCA4. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função SMARCA4. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com SMARCA4 interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.