Particules Lentivirales d'Activation (h) SLUG: sc-400389-LAC

Le gène humain **SNAI2** code le facteur de transcription à doigts de zinc **SLUG**, un régulateur clé de la transition épithélio-mésenchymateuse (EMT) qui réprime les programmes géniques épithéliaux et favorise la motilité, des phénotypes associés à l’invasion et la survie en conditions de stress. SLUG intègre des signaux issus de voies du développement et de réponse au stress, notamment les réseaux **TGF-β**, **WNT/β-caténine**, **NOTCH**, **RTK/MAPK** et les voies sensibles à l’hypoxie, afin de reprogrammer les états transcriptionnels et les décisions de destinée cellulaire. Son activité influence le remodelage du cytosquelette, la dynamique d’adhérence et la plasticité des lignages, et une régulation altérée de **SNAI2** est fréquemment étudiée dans les contextes de la progression tumorale, de la biologie des métastases et des mécanismes de résistance aux traitements. SLUG joue également des rôles dans le comportement des cellules souches/progénitrices et les programmes de différenciation, ce qui le rend pertinent pour des modèles de remodelage tissulaire et de changements phénotypiques induits par le microenvironnement.

Les particules d'activation lentivirales SLUG (h) répondent à ce besoin en encapsulant le système complet d'activation transcriptionnelle SAM (Synergistic Activation Mediator) dans des particules lentivirales à titre élevé prêtes à la transduction, permettant une régulation à la hausse efficace de SNAI2 dans un plus large éventail de types de cellules humaines.

Les particules d'activation lentivirales SLUG (h) délivrent tous les composants fonctionnels du système médiateur d'activation synergique (SAM) via la transduction lentivirale. Le système comprend trois préparations de particules co-transduites dans les cellules cibles : l'une codant pour une dCas9 catalytiquement inactive (mutations D10A et N863A) fusionnée au domaine de transactivation VP64 avec un gène de résistance à la blasticidine ; une codant pour la protéine de fusion MS2-p65-HSF1 avec un gène de résistance à l'hygromycine ; et une codant pour un ARNsg de 20 nt spécifique de la cible, fusionné à deux aptamères d'ARN MS2 avec un gène de résistance à la puromycine. Après transduction lentivirale et intégration génomique des cassettes d'expression, les composants du SAM sont exprimés de manière stable et s'assemblent au locus cible dans la région promotrice proximale en amont du site de départ de la transcription SNAI2, où VP64, p65 et HSF1 agissent de manière coopérative pour recruter l'appareil transcriptionnel endogène et induire une régulation à la hausse soutenue de l'expression endogène de SLUG. L'utilisation de dCas9 inactif sur les nucléases évite l'introduction de cassures double brin de l'ADN et préserve le locus génomique natif SNAI2 ainsi que l'architecture régulatrice.

Le format lentiviral offre plusieurs avantages pratiques : l'intégration génomique stable permet une activation héréditaire au fil des divisions cellulaires ; les préparations de particules à titre élevé éliminent le besoin d'une production virale en interne ; et la compatibilité avec les types de cellules primaires, non divisibles et résistantes à la transfection élargit l'accessibilité expérimentale. Le succès de la transduction peut être confirmé et renforcé par une triple sélection antibiotique utilisant la puromycine, l'hygromycine et la blasticidine.

Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.