SLMAP CRISPR/Cas9 KO Plasmid (m2): sc-429965-KO-2

Übersicht

Slmap kodiert das sarcolemmaassoziierte Protein (SLMAP), ein tail-anchored Membranprotein, das an intrazellulären Membranen angereichert ist, darunter am Sarkolemm, am endoplasmatischen Retikulum und an der Kernhülle. SLMAP ist an der Organisation und dem Transport von Membranen, an Signalprozessen an Zellkontakten sowie an der Kopplung an das Zytoskelett beteiligt und wurde zudem mit der Regulation der Centrosomenfunktion und des Fortschreitens des Zellzyklus in Verbindung gebracht. In erregbaren Geweben ist SLMAP mit Mikrodomänen für Ionenkanäle und die Calcium-Handhabung verknüpft, die die elektrische Aktivität und die kontraktile Homöostase unterstützen. Eine veränderte Expression oder Lokalisation von SLMAP wurde mit kardialen Leitungsphänotypen und Mechanismen in Zusammenhang mit Kardiomyopathien assoziiert, was es für Studien zur Membranarchitektur und Elektrophysiologie relevant macht.

Das SLMAP CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (m2) ist ein Pool von Plasmiden, die für die gezielte Disruption des Slmap-Gens in mouse-Zelllinien entwickelt wurden. Jedes Plasmid koexprimiert eine einzigartige Single-Guide-RNA (sgRNA), die auf eine bestimmte Stelle innerhalb des Slmap-Gens abzielt, zusammen mit der Streptococcus pyogenes Cas9-Nuklease. Die Plasmide kodieren zudem für GFP, was die fluoreszente Identifizierung und Anreicherung erfolgreich transfizierter Zellen mittels Fluoreszenzmikroskopie oder Durchflusszytometrie ermöglicht.

Das Multi-Guide-Design erhöht die Wahrscheinlichkeit, dass Insertionen oder Deletionen (Indels) entstehen, die den offenen Leserahmen von Slmap nach der Cas9-vermittelten Bildung von Doppelstrangbrüchen unterbrechen. Durch das CRISPR/Cas9-System verursachte DNA-Brüche werden über endogene NHEJ-Wege (Non-Homologous End Joining) repariert, was häufig zu Frameshift-Mutationen führt, die die SLMAP-Proteinexpression aufheben.

Dieses CRISPR-Knockout-System ermöglicht die effiziente Erzeugung von Slmap-defizienten Zellmodellen zur Untersuchung der SLMAP-Signalübertragung, für funktionelle Genomstudien, in der Krebsbiologieforschung sowie zur Bewertung therapeutischer Reaktionen in menschlichen Zelllinien.

Hauptmerkmale

• sgRNAs, die auf Slmap-Exone abzielen, die für die SLMAP-Funktion entscheidend sind
  Ko-Expression von SpCas9 und sgRNA aus einem einzigen Plasmid zur vereinfachten Verabreichung
  GFP-Reporter zur Identifizierung transfizierter Zellen
  Pool von Plasmiden, die auf mehrere Slmap-Genomstellen abzielen, um die Knockout-Effizienz zu verbessern
  Kompatibel mit der Verabreichung durch Transfektion

Designvarianten

CRISPRs +/- HDRs

• gRNAs, die vom SLMAP CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (m) und vom SLMAP CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (m2) kodiert werden, zielen auf unterschiedliche Stellen innerhalb des Slmap-Lokus ab. Es kann ein oder beide Targeting-Designs verfügbar sein. Siehe „Verwandte Produkte“ für Verfügbarkeit.
  HDR-Donorkonstrukte, kodiert durch das SLMAP HDR-Plasmid (m) und SLMAP HDR-Plasmid (m2) kodiert, enthalten eine Puromycin-Resistenzkassette und einen RFP-Reporter, flankiert von Slmap-Homologiearmen, um die homologe Reparatur an definierten Slmap-Zielstellen entsprechend den CRISPR/Cas9-KO-Designs zu unterstützen. Die Verfügbarkeit von HDR-Donoren kann variieren. Siehe „Verwandte Produkte“ für Verfügbarkeit.

Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.