Slfn5 Lentiviral Activation Particles (h): sc-408333-LAC

Humanes SLFN5 kodiert Schlafen-Familienmitglied 5 (Slfn5), ein interferonstimulierbares Protein, das an der Regulierung von Transkriptionsprogrammen beteiligt ist, welche den Zellzyklusverlauf, DNA-Schadensantworten und die angeborene Immun-Signalübertragung prägen. Slfn5 wurde mit der Modulation von Outputs des Typ-I-Interferon/JAK–STAT-Signalwegs sowie mit einer umfassenderen, chromatinassoziierten Kontrolle der Genexpression in Verbindung gebracht und beeinflusst dadurch zelluläre Proliferations- und Differenzierungszustände. Eine dysregulierte SLFN5-Expression wurde in mehreren Krebskontexten und bei inflammatorischen Signalzuständen beschrieben, wo sie mit verändertem Wachstum von Tumorzellen, Stressantworten und immunbezogenen Transkriptionssignaturen korrelieren kann. Diese Eigenschaften machen SLFN5 zu einem nützlichen Ziel, um interferongetriebene Regulation, Proliferations-Checkpoints und Genexpressionsnetzwerke zu untersuchen, die für krankheitsassoziierte Phänotypen relevant sind.

Slfn5 Lentivirale Aktivierungspartikel (h) erfüllen diesen Bedarf, indem sie das vollständige Transkriptionsaktivierungssystem des Synergistic Activation Mediator (SAM) in transduktionsbereite, hoch-titrige lentivirale Partikel verpacken und so eine effiziente SLFN5-Hochregulation über ein breiteres Spektrum menschlicher Zelltypen ermöglichen.

Slfn5 Lentivirale Aktivierungspartikel (h) liefern alle funktionellen Komponenten des Synergistic Activation Mediator (SAM)-Systems über lentivirale Transduktion. Das System umfasst drei Partikelpräparate, die gemeinsam in Zielzellen transduziert werden: eines, das für katalytisch inaktives dCas9 (Mutationen D10A und N863A) kodiert, das mit der VP64-Transaktivierungsdomäne und einem Blasticidin-Resistenzgen fusioniert ist; eines, das für das MS2-p65-HSF1-Fusionsprotein mit einem Hygromycin-Resistenzgen kodiert; und eines, das für eine zielspezifische 20-nt-sgRNA kodiert, die an zwei MS2-RNA-Aptamere mit einem Puromycin-Resistenzgen fusioniert ist. Nach der lentiviralen Transduktion und der genomischen Integration der Expressionskassetten werden die SAM-Komponenten stabil exprimiert und lagern sich am Zielort innerhalb der proximalen Promotorregion stromaufwärts der SLFN5-Transkriptionsstartstelle an, wo VP64, p65 und HSF1 kooperativ wirken, um endogene Transkriptionsmaschinerie zu rekrutieren und eine anhaltende Hochregulation der endogenen Slfn5-Expression zu bewirken. Die Verwendung von nuklease-inaktivem dCas9 verhindert die Einführung von Doppelstrangbrüchen in der DNA und bewahrt den nativen SLFN5-Genomlokus sowie die regulatorische Architektur.

Das lentivirale Format bietet mehrere praktische Vorteile: Die stabile genomische Integration unterstützt eine vererbbare Aktivierung über Zellteilungen hinweg; Partikelpräparate mit hohem Titer machen eine eigene Virusproduktion überflüssig; und die Kompatibilität mit primären, sich nicht teilenden und transfektionsresistenten Zelltypen erweitert die experimentellen Möglichkeiten. Eine erfolgreiche Transduktion kann durch eine dreifache Antibiotika-Selektion mit Puromycin, Hygromycin und Blasticidin bestätigt und verstärkt werden.

Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.