Plasmide Double Nickase (h) Slfn14: sc-415573-NIC
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (h) Slfn14 correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide Slfn14 Double Nickase (h) et le plasmide Slfn14 Double Nickase (h2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant SLFN14. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (h) Slfn14 | sc-415573-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plasmide Double Nickase (h2) Slfn14 | sc-415573-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
SLFN14 (Schlafen family member 14) code la protéine Slfn14, une protéine putative associée à l’ARN, impliquée dans la régulation de la traduction et du métabolisme de l’ARN lors du stress cellulaire et de la différenciation. En tant que membre de la famille de gènes Schlafen, Slfn14 a été associée à la modulation de programmes liés à l’immunité et au contrôle de la synthèse protéique, avec des effets recoupant des voies qui gouvernent la fonction des ribosomes et la régulation post‑transcriptionnelle. Chez l’humain, des variants de SLFN14 sont associés à une thrombocytopénie héréditaire et à des défauts de fonction plaquettaire, ce qui étaye un rôle dans la maturation des mégacaryocytes et la biologie plaquettaire. Ces caractéristiques font de SLFN14 une cible utile pour disséquer les mécanismes de l’hématopoïèse, de la gestion de l’ARN et du contrôle de l’expression génique dans des modèles cellulaires pertinents.
Slfn14 Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus SLFN14 dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de SLFN14. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de SLFN14. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de SLFN14.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.