Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
Slfn11 Plasmide Double Nickase (h): sc-401137-NIC
- Specie Target: human
- 20 µg di DNA plasmidico purificato, pronto per trasfezione; sufficiente fino a 20 trasfezioni
- Slfn11 Plasmide Double Nickase (h) consiste in un paio di plasmidi ciascuno codificante una nucleasi Cas9 mutata D10A ed un RNA guida (gRNA) di 20 nt target specifico, disegnato per il silenziamento dell'espressione genica con una maggiore specificità rispetto alla controparte CRISPR/Cas9 KO
- Le sequenze di gRNA appaiate sono offset di circa 20 bp per permettere lo specifico doppio nicking Cas9 mediato che mima un DSB
- Un plasmide dei due contiene un gene per la resistenza alla puromicina per la selezione; l'altro plasmide nella coppia contiene un marker GFP per confermare la trasfezione visivamente.
- Il Slfn11 Double Nickase Plasmid (h) e il Slfn11 Double Nickase Plasmid (h2) codificano per distinti design di gRNA accoppiati che prendono di mira SLFN11. Uno o entrambi i design potrebbero essere disponibili
- In seguito alla trasfezione, l'efficienza dll'attivazione genica può essere testata con WB, IF o IHC utilizzando l'anticorpo: Slfn11 Antibody (E-4): sc-374339
Informazioni ordini
| Nome del prodotto | Codice del prodotto | UNITÀ | Prezzo | Quantità | Preferiti | |
Slfn11 Plasmide Double Nickase (h) | sc-401137-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Slfn11 Plasmide Double Nickase (h2) | sc-401137-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
SLFN11 (Slfn11) è un fattore nucleare associato a DNA/RNA che modula le risposte cellulari allo stress replicativo e al danno genotossico, influenzando la stabilità del genoma e la progressione del ciclo cellulare. È collegato alla segnalazione della risposta al danno del DNA e alla dinamica delle forcelle di replicazione, dove può condizionare l’esito della replicazione arrestata e dei conflitti trascrizione–replicazione. L’attività di SLFN11 interseca vie attivate dall’inibizione delle topoisomerasi e dai processi di riparazione dei crosslink del DNA, rendendolo un determinante ampiamente studiato della tolleranza allo stress nelle cellule proliferanti. La disregolazione dell’espressione o della funzione di SLFN11 è stata esaminata nella biologia del cancro e in altre condizioni in cui sono rilevanti una capacità di riparazione del DNA alterata e lo stress replicativo.
Slfn11 Il plasmide Double Nickase (h) consiste in una coppia di plasmidi ingegnerizzati per l'editing ad alta specificità del locus SLFN11 nelle linee cellulari human. Ciascun plasmide esprime una nickasi Cas9 D10A e un sgRNA distinto che prende di mira filamenti di DNA opposti all'interno di SLFN11. Quando indirizzate verso siti adiacenti su filamenti di DNA opposti, le due nickasi generano tagli a filamento singolo sfalsati che insieme producono una rottura a doppio filamento sfalsata, richiedendo un'attività coordinata sul bersaglio da entrambe le guide. La rottura del DNA risultante viene risolta da vie di riparazione cellulare endogene, più comunemente attraverso la giunzione non omologa delle estremità (NHEJ), portando a inserzioni o delezioni che interrompono la funzione di SLFN11. Richiedendo il coinvolgimento di due sgRNA nel locus bersaglio, l'approccio a doppia nickasi migliora la specificità dell'editing e fornisce una strategia CRISPR complementare per applicazioni in cui è desiderato un controllo aggiuntivo sulla precisione del targeting.
Per supportare l'identificazione efficiente delle cellule modificate, un plasmide codifica la GFP per la visualizzazione fluorescente delle popolazioni trasfettate, mentre il plasmide di accompagnamento porta un gene di resistenza alla puromicina per la selezione antibiotica. Insieme, queste caratteristiche supportano l'arricchimento efficiente delle popolazioni co-trasfettate e semplificano la convalida dei cloni con SLFN11 interrotto.
Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.