SLC6A15 CRISPR/Cas9 KO Plasmid (h): sc-410592

Übersicht

SLC6A15 kodiert einen natriumabhängigen Transporter für neutrale Aminosäuren aus der SLC6-Familie, der die zelluläre Aufnahme verzweigtkettiger und anderer neutraler Aminosäuren vermittelt und so zur Aminosäurehomöostase sowie zum neurotransmitterbezogenen Stoffwechsel beiträgt. Das Gen ist in neuronalen Geweben angereichert und unterstützt Prozesse wie Nährstoffsensorik, synaptische Funktion und metabolische Kopplung über Signalwege, die mit der Verfügbarkeit von Aminosäuren und zellulären Stressantworten verknüpft sind. Variationen oder eine veränderte Expression von SLC6A15 wurden in Forschungsstudien mit neuropsychiatrischen Phänotypen und stressbezogener Biologie in Verbindung gebracht, was seine Rolle für die metabolische Belastbarkeit von Neuronen widerspiegelt. Als Membrantransporter bietet SLC6A15 zudem einen gut zugänglichen Ansatzpunkt, um Transporterregulation, Trafficking und substratabhängige Signalgebung in humanen Zellmodellen zu untersuchen.

Das SLC6A15 CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (h) ist ein Pool von Plasmiden, die für die gezielte Disruption des SLC6A15-Gens in human-Zelllinien entwickelt wurden. Jedes Plasmid koexprimiert eine einzigartige Single-Guide-RNA (sgRNA), die auf eine bestimmte Stelle innerhalb des SLC6A15-Gens abzielt, zusammen mit der Streptococcus pyogenes Cas9-Nuklease. Die Plasmide kodieren zudem für GFP, was die fluoreszente Identifizierung und Anreicherung erfolgreich transfizierter Zellen mittels Fluoreszenzmikroskopie oder Durchflusszytometrie ermöglicht.

Das Multi-Guide-Design erhöht die Wahrscheinlichkeit, dass Insertionen oder Deletionen (Indels) entstehen, die den offenen Leserahmen von SLC6A15 nach der Cas9-vermittelten Bildung von Doppelstrangbrüchen unterbrechen. Durch das CRISPR/Cas9-System verursachte DNA-Brüche werden über endogene NHEJ-Wege (Non-Homologous End Joining) repariert, was häufig zu Frameshift-Mutationen führt, die die SLC6A15-Proteinexpression aufheben.

Dieses CRISPR-Knockout-System ermöglicht die effiziente Erzeugung von SLC6A15-defizienten Zellmodellen zur Untersuchung der SLC6A15-Signalübertragung, für funktionelle Genomstudien, in der Krebsbiologieforschung sowie zur Bewertung therapeutischer Reaktionen in menschlichen Zelllinien.

Hauptmerkmale

• sgRNAs, die auf SLC6A15-Exone abzielen, die für die SLC6A15-Funktion entscheidend sind
  Ko-Expression von SpCas9 und sgRNA aus einem einzigen Plasmid zur vereinfachten Verabreichung
  GFP-Reporter zur Identifizierung transfizierter Zellen
  Pool von Plasmiden, die auf mehrere SLC6A15-Genomstellen abzielen, um die Knockout-Effizienz zu verbessern
  Kompatibel mit der Verabreichung durch Transfektion

Designvarianten

CRISPRs +/- HDRs

• gRNAs, die vom SLC6A15 CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (h) und vom SLC6A15 CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (h2) kodiert werden, zielen auf unterschiedliche Stellen innerhalb des SLC6A15-Lokus ab. Es kann ein oder beide Targeting-Designs verfügbar sein. Siehe „Verwandte Produkte“ für Verfügbarkeit.
  HDR-Donorkonstrukte, kodiert durch das SLC6A15 HDR-Plasmid (h) und SLC6A15 HDR-Plasmid (h2) kodiert, enthalten eine Puromycin-Resistenzkassette und einen RFP-Reporter, flankiert von SLC6A15-Homologiearmen, um die homologe Reparatur an definierten SLC6A15-Zielstellen entsprechend den CRISPR/Cas9-KO-Designs zu unterstützen. Die Verfügbarkeit von HDR-Donoren kann variieren. Siehe „Verwandte Produkte“ für Verfügbarkeit.

Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.