SLC39A13 CRISPR/Cas9 KO Plasmid (h): sc-406673

Übersicht

SLC39A13 (ZIP13) ist ein Mitglied der SLC39‑Familie von Zinkimportern, die die intrazelluläre Verteilung von Zn2+ reguliert, indem sie Zink aus intrazellulären Kompartimenten in das Zytosol transportiert. Durch die Steuerung der Zinkverfügbarkeit beeinflusst SLC39A13 die Aktivität von Metalloproteinen, die Redoxhomöostase sowie Signalwege, die auf Zink als strukturellen oder katalytischen Kofaktor angewiesen sind – darunter auch Prozesse im Zusammenhang mit der Organisation der extrazellulären Matrix und der Entwicklung von Bindegewebe. Eine genetische Störung von SLC39A13 wurde mit einer spondylocheirodysplastischen Form des Ehlers‑Danlos‑Syndroms in Verbindung gebracht, was seine Bedeutung für die Kollagenreifung, die Gewebeintegrität und die Mechanobiologie unterstreicht. Ein veränderter, durch ZIP13 vermittelter Zinktransport wurde außerdem mit einer dysregulierten Fibroblastenfunktion und weitreichenden transkriptionellen Antworten auf Metallstress verknüpft.

Das SLC39A13 CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (h) ist ein Pool von Plasmiden, die für die gezielte Disruption des SLC39A13-Gens in human-Zelllinien entwickelt wurden. Jedes Plasmid koexprimiert eine einzigartige Single-Guide-RNA (sgRNA), die auf eine bestimmte Stelle innerhalb des SLC39A13-Gens abzielt, zusammen mit der Streptococcus pyogenes Cas9-Nuklease. Die Plasmide kodieren zudem für GFP, was die fluoreszente Identifizierung und Anreicherung erfolgreich transfizierter Zellen mittels Fluoreszenzmikroskopie oder Durchflusszytometrie ermöglicht.

Das Multi-Guide-Design erhöht die Wahrscheinlichkeit, dass Insertionen oder Deletionen (Indels) entstehen, die den offenen Leserahmen von SLC39A13 nach der Cas9-vermittelten Bildung von Doppelstrangbrüchen unterbrechen. Durch das CRISPR/Cas9-System verursachte DNA-Brüche werden über endogene NHEJ-Wege (Non-Homologous End Joining) repariert, was häufig zu Frameshift-Mutationen führt, die die SLC39A13-Proteinexpression aufheben.

Dieses CRISPR-Knockout-System ermöglicht die effiziente Erzeugung von SLC39A13-defizienten Zellmodellen zur Untersuchung der SLC39A13-Signalübertragung, für funktionelle Genomstudien, in der Krebsbiologieforschung sowie zur Bewertung therapeutischer Reaktionen in menschlichen Zelllinien.

Hauptmerkmale

• sgRNAs, die auf SLC39A13-Exone abzielen, die für die SLC39A13-Funktion entscheidend sind
  Ko-Expression von SpCas9 und sgRNA aus einem einzigen Plasmid zur vereinfachten Verabreichung
  GFP-Reporter zur Identifizierung transfizierter Zellen
  Pool von Plasmiden, die auf mehrere SLC39A13-Genomstellen abzielen, um die Knockout-Effizienz zu verbessern
  Kompatibel mit der Verabreichung durch Transfektion

Designvarianten

CRISPRs +/- HDRs

• gRNAs, die vom SLC39A13 CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (h) und vom SLC39A13 CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (h2) kodiert werden, zielen auf unterschiedliche Stellen innerhalb des SLC39A13-Lokus ab. Es kann ein oder beide Targeting-Designs verfügbar sein. Siehe „Verwandte Produkte“ für Verfügbarkeit.
  HDR-Donorkonstrukte, kodiert durch das SLC39A13 HDR-Plasmid (h) und SLC39A13 HDR-Plasmid (h2) kodiert, enthalten eine Puromycin-Resistenzkassette und einen RFP-Reporter, flankiert von SLC39A13-Homologiearmen, um die homologe Reparatur an definierten SLC39A13-Zielstellen entsprechend den CRISPR/Cas9-KO-Designs zu unterstützen. Die Verfügbarkeit von HDR-Donoren kann variieren. Siehe „Verwandte Produkte“ für Verfügbarkeit.

Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.