SLC35F2 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h): sc-406765

Descripción general

SLC35F2 codifica un transportador de membrana multipaso previsto, localizado en membranas intracelulares, con evidencias que respaldan un papel en el tráfico de solutos que influye en la captación celular y la distribución compartimental de moléculas pequeñas. Como miembro de la familia SLC35, SLC35F2 se asocia a procesos de transporte de membrana que pueden afectar la homeostasis metabólica, la función de los orgánulos y las respuestas al estrés celular. Una actividad alterada del transportador puede modular la exposición intracelular a xenobióticos y metabolitos endógenos, vinculando a SLC35F2 con mecanismos relevantes para la farmacología y la biología de las células cancerosas. En consecuencia, SLC35F2 se investiga con frecuencia en estudios de sensibilidad dependiente del transporte, aptitud celular y determinantes a nivel de vía de la respuesta a compuestos.

El plásmido CRISPR/Cas9 KO SLC35F2 (h) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen SLC35F2 en líneas celulares human. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del SLC35F2 junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.

El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de SLC35F2 tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína SLC35F2.

Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en SLC35F2 para la investigación de la señalización de SLC35F2, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.

Características principales

• sgRNA dirigidos a los exones de SLC35F2 críticos para la función de SLC35F2
  Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
  Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
  Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de SLC35F2 para mejorar la eficiencia del knockout
  Compatible con la administración mediante transfección

Variantes de diseño

CRISPRs +/- HDRs

• Los gRNA codificados por el plásmido SLC35F2 CRISPR/Cas9 KO (h) y el plásmido SLC35F2 CRISPR/Cas9 KO (h2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus SLC35F2. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
  Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR SLC35F2 (h) y el plásmido HDR SLC35F2 (h2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología SLC35F2 para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana SLC35F2 definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.

Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.