Plasmide Double Nickase (h) SLC35B4: sc-413728-NIC
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (h) SLC35B4 correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide SLC35B4 Double Nickase (h) et le plasmide SLC35B4 Double Nickase (h2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant SLC35B4. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (h) SLC35B4 | sc-413728-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plasmide Double Nickase (h2) SLC35B4 | sc-413728-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
SLC35B4 code un transporteur de sucres nucléotidiques localisé dans l’appareil de Golgi, qui importe l’UDP‑xylose et l’UDP‑N‑acétylglucosamine dans la lumière golgienne afin de soutenir la glycosylation et la biosynthèse des protéoglycanes. En régulant la disponibilité des sucres nucléotidiques, SLC35B4 influence la composition et la maturation des glycannes des protéines sécrétées et membranaires, avec des effets sur la signalisation à la surface cellulaire et le trafic protéique. Des altérations du transport des sucres nucléotidiques et des profils de glycosylation en aval ont été associées à des modifications de la régulation métabolique, de la croissance cellulaire et des réponses au stress, faisant de SLC35B4 un nœud pertinent pour l’étude des voies dépendantes des glycannes. La dérégulation de la glycosylation est fréquemment liée à une biologie complexe des maladies, notamment la dysfonction métabolique et des phénotypes oncogéniques, ce qui fournit un cadre mécanistique pour les modèles de recherche.
SLC35B4 Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus SLC35B4 dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de SLC35B4. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de SLC35B4. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de SLC35B4.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.