Plásmido Doble Nickase (h) SLC35A4: sc-414030-NIC
- Especies Diana: human
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- El Plásmido Double Nickase (h)SLC35A4 consisten en un par de plásmidos cada uno codificando una nucleasa Cas9 mutada D10A y una guia de ARN de 20 nucleótidos (gRNA) diseñados para una mayor especificidad que el homologo CRISPR/Cas9 KO
- Las secuencias de gRNA tienen una diferencia de unas 20 pb para permitir un corte doble mediado por Cas9 en el ADN que imita el doble corte
- Uno de los plásmidos contiene el gen de resistencia a puromicina para la selección y el otro el marcado GFP para confirmar visualmente la transfección
- El plásmido de doble nickasa SLC35A4 (h) y el plásmido de doble nickasa SLC35A4 (h2) codifican diseños distintos de pares de gRNA dirigidos a SLC35A4. Puede que esté disponible uno o ambos diseños
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
Plásmido Doble Nickase (h) SLC35A4 | sc-414030-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plásmido Doble Nickase (h2) SLC35A4 | sc-414030-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
SLC35A4 codifica un miembro de la familia 35 de transportadores de azúcares-nucleótido (solute carrier), un grupo que sustenta el suministro luminal de azúcares activados al RE y al Golgi para reacciones de glicosilación. Aunque SLC35A4 está menos caracterizado que otros paralogos de SLC35, se ha implicado en la regulación de la homeostasis de azúcares-nucleótido, lo que influye en la biosíntesis de glicoproteínas y glicolípidos, el plegamiento proteico y el tráfico intracelular. La alteración del transporte de azúcares-nucleótido y de las redes de glicosilación aguas abajo puede remodelar la composición y la señalización de la superficie celular, afectando procesos como la adhesión, la maduración de receptores y el reconocimiento inmunitario. En consecuencia, SLC35A4 es de interés para estudios mecanísticos en glicómica y biología de la vía secretora, y para investigar cómo la glicosilación alterada contribuye a respuestas de estrés celular y fenotipos asociados a enfermedades.
SLC35A4 El plásmido de doble nicasa (h) consiste en un par de plásmidos emparejados diseñados para la edición de alta especificidad del locus SLC35A4 en líneas celulares human. Cada plásmido expresa una nicasa Cas9 D10A y un ARN guía específico (sgRNA) dirigido a cadenas de ADN opuestas dentro de SLC35A4. Cuando se dirigen a sitios adyacentes en cadenas de ADN opuestas, las dos nicasas generan cortes en cadena simple desplazados que, juntos, producen una rotura de doble cadena escalonada, lo que requiere una actividad coordinada sobre el objetivo por parte de ambas guías. La rotura de ADN resultante se resuelve mediante vías de reparación celular endógenas, más comúnmente a través de la unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que da lugar a inserciones o deleciones que alteran la función de SLC35A4. Al requerir la participación de dos ARN guía en el locus diana, el enfoque de doble corte mejora la especificidad de la edición y proporciona una estrategia CRISPR complementaria para aplicaciones en las que se desea un control adicional sobre la precisión de la orientación.
Para facilitar la identificación eficiente de las células editadas, un plásmido codifica GFP para la visualización fluorescente de las poblaciones transfectadas, mientras que el plásmido complementario lleva un gen de resistencia a la puromicina para la selección con antibióticos. En conjunto, estas características facilitan el enriquecimiento eficiente de las poblaciones cotransfectadas y simplifican la validación de los clones con SLC35A4 alterado.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.