SLC25A3 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h): sc-404129
- Especies Diana: human
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- SLC25A3 El plásmido CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h) es un conjunto de plásmidos, cada uno de los cuales codifica la nucleasa Cas9 y un ARN guía (gRNA) de 20 nt específico para el objetivo, diseñado para lograr la máxima eficiencia de knockout utilizando secuencias derivadas de la biblioteca GeCKO v2
- Las secuencias de gRNA dirigen a Cas9 para que induzca roturas de doble cadena (DSB) específicas en el locus genómico SLC25A3, lo que da lugar a la inactivación del gen mediante unión de extremos no homólogos (NHEJ)
- Los genes de resistencia a la puromicina y RFP están flanqueados por sitios LoxP, lo que permite la eliminación de los marcadores de selección mediante la recombinasa Cre (Vector Cre: sc-418923) tras el establecimiento de líneas celulares knockout estables
- Tras la transfección, la eficacia del knockout puede comprobarse mediante WB, IF ó IHC utilzando el anticuerpo: SLC25A3 Anticuerpo (F-1): sc-376742
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
SLC25A3 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h) | sc-404129 | 20 µg | $397.00 |
Descripción general
SLC25A3 codifica el transportador mitocondrial de fosfato (PiC), un transportador de solutos de la membrana interna que importa fosfato inorgánico a la matriz para apoyar la fosforilación oxidativa. Al aportar fosfato para la ATP sintasa y coordinarse con las translocasas de nucleótidos de adenina, SLC25A3 ayuda a mantener la homeostasis energética celular, el potencial de membrana mitocondrial y el equilibrio de metabolitos en tejidos de alta demanda. La alteración de la función de SLC25A3 se ha vinculado con una respiración mitocondrial deteriorada y fenotipos de deficiencia energética, con relevancia para disfunciones neuromusculares y cardiometabólicas. Su actividad se estudia habitualmente en el contexto de la bioenergética mitocondrial, el metabolismo del fosfato y las respuestas al estrés que influyen en el manejo de las ROS y la susceptibilidad a la apoptosis.
El plásmido CRISPR/Cas9 KO SLC25A3 (h) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen SLC25A3 en líneas celulares human. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del SLC25A3 junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.
El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de SLC25A3 tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína SLC25A3.
Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en SLC25A3 para la investigación de la señalización de SLC25A3, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.
Características principales
- sgRNA dirigidos a los exones de SLC25A3 críticos para la función de SLC25A3
Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de SLC25A3 para mejorar la eficiencia del knockout
Compatible con la administración mediante transfección
Variantes de diseño
CRISPRs +/- HDRs
- Los gRNA codificados por el plásmido SLC25A3 CRISPR/Cas9 KO (h) y el plásmido SLC25A3 CRISPR/Cas9 KO (h2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus SLC25A3. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR SLC25A3 (h) y el plásmido HDR SLC25A3 (h2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología SLC25A3 para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana SLC25A3 definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.