Datos CRISPR no: la imagen ilustra la calidad de los anticuerpos para visualizar los resultados de los experimentos CRISPR.
Datos CRISPR no: la imagen ilustra la calidad de los anticuerpos para visualizar los resultados de los experimentos CRISPR.
Ska2 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h): sc-405933
- Especies Diana: human
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- Ska2 El plásmido CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h) es un conjunto de plásmidos, cada uno de los cuales codifica la nucleasa Cas9 y un ARN guía (gRNA) de 20 nt específico para el objetivo, diseñado para lograr la máxima eficiencia de knockout utilizando secuencias derivadas de la biblioteca GeCKO v2
- Las secuencias de gRNA dirigen a Cas9 para que induzca roturas de doble cadena (DSB) específicas en el locus genómico Ska2, lo que da lugar a la inactivación del gen mediante unión de extremos no homólogos (NHEJ)
- Los genes de resistencia a la puromicina y RFP están flanqueados por sitios LoxP, lo que permite la eliminación de los marcadores de selección mediante la recombinasa Cre (Vector Cre: sc-418923) tras el establecimiento de líneas celulares knockout estables
- Tras la transfección, la eficacia del knockout puede comprobarse mediante WB, IF ó IHC utilzando el anticuerpo: Ska2 Anticuerpo (H-2): sc-514495
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
Ska2 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h) | sc-405933 | 20 µg | $397.00 |
Descripción general
SKA2 codifica la subunidad 2 del complejo asociado al huso y al cinetocoro (Ska2), un componente central del complejo SKA que coopera con el complejo NDC80 para estabilizar las uniones cinetocoro–microtúbulo durante la mitosis. Ska2 favorece la alineación de los cromosomas y el inicio de la anafase al promover una unión persistente de los microtúbulos por el extremo (“end-on”) y contribuir al silenciamiento del punto de control del huso. A través de su papel en la progresión mitótica, SKA2 influye en la dinámica del ciclo celular, la fidelidad de la segregación cromosómica y la estabilidad genómica. La expresión o función desregulada de SKA2 se ha asociado con fenotipos proliferativos e inestabilidad cromosómica observados en múltiples contextos patológicos, lo que la hace relevante para estudios mecanísticos de respuestas al estrés vinculadas a la división celular.
El plásmido CRISPR/Cas9 KO Ska2 (h) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen SKA2 en líneas celulares human. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del SKA2 junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.
El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de SKA2 tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína Ska2.
Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en SKA2 para la investigación de la señalización de Ska2, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.
Características principales
- sgRNA dirigidos a los exones de SKA2 críticos para la función de Ska2
Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de SKA2 para mejorar la eficiencia del knockout
Compatible con la administración mediante transfección
Variantes de diseño
CRISPRs +/- HDRs
- Los gRNA codificados por el plásmido Ska2 CRISPR/Cas9 KO (h) y el plásmido Ska2 CRISPR/Cas9 KO (h2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus SKA2. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR Ska2 (h) y el plásmido HDR Ska2 (h2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología SKA2 para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana SKA2 definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.