SK1 Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-403325-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- SK1O plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase SK1 (h) e o Plasmídeo Double Nickase SK1 (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para KCNN1. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
SK1 Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-403325-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
SK1 Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-403325-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
O KCNN1 humano codifica o canal de potássio SK1 de pequena condutância ativado por Ca2+, uma condutância de K+ regulada pela calmodulina que conecta a dinâmica intracelular de Ca2+ à repolarização da membrana. Ao modular a pós-hiperpolarização e os padrões de disparo, o SK1 contribui para o controlo dependente de Ca2+ da excitabilidade neuronal e da integração de sinais, com funções adicionais descritas noutros tipos celulares eletricamente ativos e secretores. A atividade do KCNN1 cruza-se com a sinalização de Ca2+/calmodulina, com programas transcricionais dependentes da excitabilidade e com vias de homeostase iónica que influenciam as respostas celulares ao stress. A desregulação da função dos canais da família SK tem sido estudada no contexto da neurofisiologia e de fenótipos neuropsiquiátricos, nos quais a excitabilidade intrínseca alterada e a sincronização de redes são leituras experimentais relevantes.
SK1 O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus KCNN1 em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de KCNN1. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função KCNN1. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com KCNN1 interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.