Plásmido Doble Nickase (h) SIRT6: sc-412216-NIC

SIRT6 codifica una desacetilasa/ADP-ribosiltransferasa nuclear dependiente de NAD+ que modula la estructura de la cromatina y la transcripción al desacetilar sustratos de histonas como H3K9ac y H3K56ac. Funciona en la intersección entre la señalización del daño en el ADN y el mantenimiento del genoma, promoviendo la reparación de roturas de doble cadena, la integridad de los telómeros y la tolerancia al estrés replicativo. SIRT6 también regula redes génicas metabólicas mediante interacciones con factores como NF-κB y HIF-1α, vinculando el estado de la cromatina con la inflamación y la programación glucolítica. La actividad desregulada de SIRT6 se ha asociado con procesos relevantes para la biología del envejecimiento, la disfunción metabólica, la neurodegeneración y la inestabilidad genómica asociada al cáncer, lo que la convierte en un nodo útil para estudios mecanísticos.

SIRT6 El plásmido de doble nicasa (h) consiste en un par de plásmidos emparejados diseñados para la edición de alta especificidad del locus SIRT6 en líneas celulares human. Cada plásmido expresa una nicasa Cas9 D10A y un ARN guía específico (sgRNA) dirigido a cadenas de ADN opuestas dentro de SIRT6. Cuando se dirigen a sitios adyacentes en cadenas de ADN opuestas, las dos nicasas generan cortes en cadena simple desplazados que, juntos, producen una rotura de doble cadena escalonada, lo que requiere una actividad coordinada sobre el objetivo por parte de ambas guías. La rotura de ADN resultante se resuelve mediante vías de reparación celular endógenas, más comúnmente a través de la unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que da lugar a inserciones o deleciones que alteran la función de SIRT6. Al requerir la participación de dos ARN guía en el locus diana, el enfoque de doble corte mejora la especificidad de la edición y proporciona una estrategia CRISPR complementaria para aplicaciones en las que se desea un control adicional sobre la precisión de la orientación.

Para facilitar la identificación eficiente de las células editadas, un plásmido codifica GFP para la visualización fluorescente de las poblaciones transfectadas, mientras que el plásmido complementario lleva un gen de resistencia a la puromicina para la selección con antibióticos. En conjunto, estas características facilitan el enriquecimiento eficiente de las poblaciones cotransfectadas y simplifican la validación de los clones con SIRT6 alterado.

Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.