Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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Plasmide Double Nickase (m) Sigma Receptor: sc-422068-NIC
- Espèces cibles: mouse
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (m) Sigma Receptor correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide Sigma Receptor Double Nickase (m) et le plasmide Sigma Receptor Double Nickase (m2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant Sigmar1. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
- Après transfection, l'efficacité de knockout de gène peut être évaluée par WB, IF ou IHC en utilisant l'anticorps: Sigma Receptor Antibody (B-5): sc-137075
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (m) Sigma Receptor | sc-422068-NIC | 20 µg | $410.00 |
Sigmar1 code pour le récepteur sigma 1 (SIGMAR1), une protéine chaperonne membranaire du réticulum endoplasmique, enrichie au niveau des membranes du RE associées aux mitochondries, qui module les échanges de Ca2+, la signalisation du stress du RE et la protéostasie. Dans les cellules de souris, SIGMAR1 influence la bioénergétique mitochondriale et les réponses au stress oxydatif via son couplage aux flux calciques dépendants d’IP3R et aux voies adaptatives de la réponse aux protéines mal conformées (UPR). La protéine intervient également dans le métabolisme et le trafic des lipides, en façonnant l’organisation des microdomaines membranaires et la signalisation des récepteurs. Une activité dérégulée de SIGMAR1 a été associée dans la littérature à la neurodégénérescence, à la douleur neuropathique et à des phénotypes de stress métabolique, ce qui en fait un nœud utile pour des études mécanistiques de l’homéostasie cellulaire.
Sigma Receptor Le plasmide double nickase (m) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus Sigmar1 dans les lignées cellulaires mouse. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de Sigmar1. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de Sigmar1. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de Sigmar1.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.