Plasmide Double Nickase (h) Sigma Receptor: sc-400615-NIC

Le gène humain **SIGMAR1** code le récepteur sigma-1, une chaperonne membranaire du réticulum endoplasmique, enrichie aux membranes associées aux mitochondries, qui régule les échanges de calcium, l'homéostasie lipidique et la signalisation en réponse au stress. En modulant l'activité du récepteur à l'IP3, l'arrimage RE–mitochondrie et les programmes de réponse aux protéines mal repliées, **SIGMAR1** influence la protéostase, la bioénergétique et la survie cellulaire en conditions de stress oxydatif et protéotoxique. La signalisation du récepteur sigma-1 s'entrecroise avec la neurotransmission, la fonction des canaux ioniques et les voies inflammatoires, reliant **SIGMAR1** à des mécanismes impliqués dans la neurodégénérescence, la douleur neuropathique et des phénotypes neuropsychiatriques. Ces propriétés font de **SIGMAR1** une cible utile pour disséquer la communication entre organites et les réseaux d'adaptation au stress dans des modèles de cellules humaines.

Sigma Receptor Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus SIGMAR1 dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de SIGMAR1. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de SIGMAR1. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.

Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de SIGMAR1.

Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.