Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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SH3BGRL Plasmide KO CRISPR/Cas9 (h): sc-406958
- Specie Target: human
- 20 µg di DNA plasmidico purificato, pronto per trasfezione; sufficiente fino a 20 trasfezioni
- SH3BGRL Il plasmide CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h) è un pool di plasmidi, ciascuno dei quali codifica la nucleasi Cas9 e un RNA guida (gRNA) specifico per il bersaglio di 20 nt, progettato per la massima efficienza di knockout utilizzando sequenze derivate dalla libreria GeCKO v2
- Le sequenze gRNA indirizzano Cas9 a indurre rotture a doppio filamento (DSB) sito-specifiche nel locus genomico SH3BGRL, con conseguente knockout genico tramite giunzione non omologa (NHEJ)
- I geni di resistenza alla puromicina e RFP sono fiancheggiati da siti LoxP, consentendo la rimozione dei marcatori di selezione tramite la ricombinasi Cre (Cre Vector: sc-418923) dopo aver stabilito linee cellulari knockout stabili
- In seguito alla trasfezione, l'efficienza dll'attivazione genica può essere testata con WB, IF o IHC utilizzando l'anticorpo: SH3BGRL Antibody (E-5): sc-377108
Informazioni ordini
| Nome del prodotto | Codice del prodotto | UNITÀ | Prezzo | Quantità | Preferiti | |
SH3BGRL Plasmide KO CRISPR/Cas9 (h) | sc-406958 | 20 µg | $397.00 |
Panoramica
SH3BGRL (proteina simile alla “SH3 domain binding glutamate rich protein”) codifica una piccola proteina di tipo adattatore in grado di modulare le interazioni proteina–proteina che coinvolgono complessi di segnalazione con domini SH3. È stata associata alla regolazione della dinamica del citoscheletro, della segnalazione sensibile allo stato redox e di vie legate allo stress che influenzano le decisioni cellulari in termini di crescita e sopravvivenza. Un’alterata espressione di SH3BGRL è stata riportata in molteplici contesti tumorali ed è stata studiata in relazione al comportamento invasivo e a cambiamenti nella segnalazione proliferativa. Queste caratteristiche rendono SH3BGRL rilevante per studi meccanicistici sulla trasduzione del segnale, sulla regolazione dello stato cellulare e sul rimodellamento delle vie di segnalazione in modelli di malattia.
Il plasmide CRISPR/Cas9 KO SH3BGRL (h) è un pool di plasmidi progettato per la distruzione mirata del gene SH3BGRL in linee cellulari human. Ciascun plasmide co-esprime un singolo RNA guida (sgRNA) unico che prende di mira un sito distinto all'interno del SH3BGRL insieme alla nucleasi Cas9 di Streptococcus pyogenes. I plasmidi codificano anche per la GFP, consentendo l'identificazione fluorescente e l'arricchimento delle cellule trasfettate con successo tramite microscopia a fluorescenza o citometria a flusso.
Il design multi-guida aumenta la probabilità di generare inserzioni o delezioni (indels) che interrompono il frame di lettura aperto SH3BGRL a seguito della formazione di rotture a doppio filamento mediate da Cas9. Le rotture del DNA introdotte dal sistema CRISPR/Cas9 vengono riparate attraverso vie endogene di giunzione non omologa (NHEJ), che spesso provocano mutazioni con spostamento del frame che annullano l'espressione della proteina SH3BGRL.
Questo sistema di knockout CRISPR consente la generazione efficiente di modelli cellulari carenti di SH3BGRL per lo studio della segnalazione di SH3BGRL, studi di genomica funzionale, ricerca sulla biologia del cancro e valutazione delle risposte terapeutiche in linee cellulari umane.
Caratteristiche principali
- sgRNA mirati agli esoni SH3BGRL critici per la funzione di SH3BGRL
Co-espressione di SpCas9 e sgRNA da un singolo plasmide per una somministrazione semplificata
Reporter GFP per l'identificazione delle cellule trasfettate
Pool di plasmidi mirati a più siti genomici di SH3BGRL per migliorare l'efficienza del knockout
Compatibile con la somministrazione tramite trasfezione
Varianti di progettazione
CRISPR +/- HDR
- Gli gRNA codificati dal SH3BGRL CRISPR/Cas9 KO Plasmid (h) e dal SH3BGRL CRISPR/Cas9 KO Plasmid (h2) prendono di mira siti distinti all'interno del locus SH3BGRL. Potrebbe essere disponibile uno o entrambi i design di targeting. Vedere Prodotti correlati per la disponibilità.
I costrutti donatori HDR codificati dal SH3BGRL Plasmide HDR (h) e il plasmide HDR SH3BGRL (h2) contengono una cassetta di resistenza alla puromicina e un reporter RFP affiancato da bracci di omologia SH3BGRL per supportare la riparazione diretta dall'omologia in siti bersaglio SH3BGRL definiti corrispondenti ai disegni CRISPR/Cas9 KO. La disponibilità dei donatori HDR può variare. Vedere Prodotti correlati per la disponibilità.
Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.