Plasmide Double Nickase (h) Septin 11: sc-407969-NIC
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (h) Septin 11 correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide Septin 11 Double Nickase (h) et le plasmide Septin 11 Double Nickase (h2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant SEPT11. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (h) Septin 11 | sc-407969-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plasmide Double Nickase (h2) Septin 11 | sc-407969-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
SEPT11 code la septine 11, une protéine cytosquelettique liant le GTP qui s’assemble en filaments de septines hétéro-oligomériques et en structures en forme d’anneau, agissant comme barrières de diffusion et comme échafaudages au niveau des membranes. La septine 11 contribue à la coordination actine–microtubules lors de la cytokinèse, de la polarisation cellulaire, du trafic vésiculaire et de la morphologie des neurites, en s’intégrant à des voies qui régissent l’organisation corticale et la fidélité de la division cellulaire. Des altérations de la dynamique du réseau de septines et une dérégulation de SEPT11 ont été étudiées dans des contextes de prolifération et de migration aberrantes ainsi qu’en neurobiologie, où le remodelage du cytosquelette et la compartimentation membranaire sont centraux. Ces caractéristiques font de SEPT11 une cible utile pour explorer les interactions entre voies du cytosquelette, la signalisation associée aux membranes et les points de contrôle structurels liés au cycle cellulaire dans des modèles de cellules humaines.
Septin 11 Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus SEPT11 dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de SEPT11. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de SEPT11. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de SEPT11.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.