Plasmide Double Nickase (h) SENP5: sc-404428-NIC
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (h) SENP5 correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide SENP5 Double Nickase (h) et le plasmide SENP5 Double Nickase (h2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant SENP5. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
- Après transfection, l'efficacité de knockout de gène peut être évaluée par WB, IF ou IHC en utilisant l'anticorps: SENP5 Antibody (3C2): sc-293373
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (h) SENP5 | sc-404428-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plasmide Double Nickase (h2) SENP5 | sc-404428-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
Le gène humain **SENP5** code une protéase spécifique de SUMO qui enlève les modifications SUMO des protéines substrats, modulant ainsi le contrôle, dépendant de SUMO, de la stabilité des protéines, de leur localisation et de l’assemblage de complexes macromoléculaires. L’activité de SENP5 contribue à la coordination de la progression du cycle cellulaire et des événements mitotiques, avec des rôles rapportés dans des processus associés au centrosome et au nucléole, ainsi que dans le maintien de la protéostasie lors du stress cellulaire. En régulant l’équilibre entre SUMOylation et déSUMOylation, SENP5 influence des programmes transcriptionnels et des voies de signalisation de la réponse aux dommages de l’ADN qui façonnent la fitness cellulaire et l’intégrité du génome. Une activité dérégulée de la voie SUMO, notamment une altération de la fonction de la famille SENP, a été associée à des phénotypes prolifératifs et à des caractéristiques moléculaires observées dans de multiples contextes pathologiques, faisant de SENP5 un nœud utile pour des études mécanistiques.
SENP5 Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus SENP5 dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de SENP5. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de SENP5. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de SENP5.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.