Plasmide Double Nickase (h) SEMA7A: sc-403873-NIC
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (h) SEMA7A correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide SEMA7A Double Nickase (h) et le plasmide SEMA7A Double Nickase (h2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant SEMA7A. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
- Après transfection, l'efficacité de knockout de gène peut être évaluée par WB, IF ou IHC en utilisant l'anticorps: SEMA7A Antibody (C-6): sc-374432
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (h) SEMA7A | sc-403873-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plasmide Double Nickase (h2) SEMA7A | sc-403873-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
SEMA7A (sémaphorine 7A/CD108) est une protéine d’orientation et d’immunorégulation ancrée à la membrane par un glycosylphosphatidylinositol (GPI), qui médie les interactions cellule–cellule et cellule–matrice. Elle transmet des signaux via des récepteurs comprenant notamment des intégrines et des voies dépendantes des plexines afin de moduler le remodelage du cytosquelette, l’adhérence, la migration et la croissance axonale, et elle peut influencer l’activation inflammatoire ainsi que les programmes de remodelage tissulaire. Dans les cellules humaines, SEMA7A a été impliquée dans la régulation du trafic des cellules immunitaires et des réponses fibrotiques, ce qui la relie à des mécanismes pertinents pour l’inflammation chronique, la neurobiologie et le remodelage du microenvironnement. Une expression ou une signalisation dérégulée de SEMA7A a été associée à des altérations pathologiques de la fibrose ainsi qu’à la dynamique immunitaire et stromale associée aux tumeurs, ce qui étaye son utilisation comme cible dans des études mécanistiques.
SEMA7A Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus SEMA7A dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de SEMA7A. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de SEMA7A. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de SEMA7A.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.