Não são dados CRISPR: a imagem ilustra a qualidade do anticorpo para visualizar os resultados da experiência CRISPR.
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SEMA5B Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m): sc-422886
- alvos específicos: mouse
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- SEMA5B O Plasmídeo CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (m) é um conjunto de plasmídeos, cada um codificando a nuclease Cas9 e um RNA guia (gRNA) de 20 nt específico para o alvo, concebido para uma eficiência máxima de knockout utilizando sequências derivadas da biblioteca GeCKO v2
- As sequências de gRNA direcionam a Cas9 para induzir quebras de cadeia dupla (DSBs) específicas do local no locus genómico SEMA5B, resultando no knockout do gene através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ)
- Os genes de resistência à puromicina e RFP são flanqueados por sítios LoxP, permitindo a remoção de marcadores de seleção através da recombinase Cre (Cre Vector: sc-418923) após o estabelecimento de linhas celulares knockout estáveis
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
SEMA5B Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) | sc-422886 | 20 µg | $397.00 |
Visão geral
Sema5b codifica a pista de orientação transmembranar SEMA5B, um membro da família das semaforinas que regula a sinalização dependente de contacto durante o desenvolvimento neural e a montagem de circuitos sinápticos. A SEMA5B influencia a orientação axonal, o padrão de ramificação dendrítica e o crescimento de neuritos por vias que envolvem recetores plexina e a remodelação subsequente do citoesqueleto. Em modelos murinos, alterações na atividade de Sema5b têm sido associadas a mudanças na conectividade e na plasticidade neuronal, o que sustenta a sua relevância para estudos dos mecanismos de doenças do neurodesenvolvimento e neuropsiquiátricas. A sua expressão no sistema nervoso também a torna um alvo útil para investigar programas de comunicação célula–célula que moldam o padrão de organização dos tecidos.
O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO SEMA5B (m) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene Sema5b em linhas celulares mouse. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do Sema5b, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.
O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do Sema5b na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína SEMA5B.
Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de Sema5b para a investigação da sinalização de SEMA5B, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.
Características principais
- sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) Sema5b críticos para a função SEMA5B
Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
Repórter GFP para identificação de células transfectadas
Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos Sema5b para melhorar a eficiência do knockout
Compatível com administração por transfecção
Variantes de Design
CRISPRs +/- HDRs
- Os gRNAs codificados pelo SEMA5B Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) e pelo SEMA5B Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m2) têm como alvo locais distintos dentro do locus Sema5b. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
As construções doadoras HDR codificadas pelo SEMA5B Plasmídeo HDR (m) e o Plasmídeo HDR SEMA5B (m2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia Sema5b para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo Sema5b definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.