Selenoprotein P Plásmido CRISPR/Cas9 KO (bovine2): sc-437342

Descripción general

La selenoproteína P (SELENOP) es una glucoproteína secretada rica en residuos de selenocisteína que actúa como el principal factor de transporte y almacenamiento de selenio en los mamíferos, favoreciendo la distribución sistémica del selenio y la homeostasis redox. Contribuye a la defensa antioxidante al aportar selenio para la biosíntesis de selenoenzimas, influyendo en las respuestas celulares al estrés oxidativo, la inflamación y el estrés del retículo endoplásmico. En la biología bovina, SELENOP es relevante para la secreción hepática, la regulación vascular y metabólica y la inmunidad dependiente del selenio, vinculando el estado del selenio con el daño oxidativo y la señalización inflamatoria. La desregulación de la expresión de SELENOP o de la disponibilidad de selenio se asocia con alteraciones en la señalización redox y desequilibrios metabólicos, lo que la convierte en un punto de entrada molecular útil para estudiar vías de adaptación al estrés e interacciones nutriente–gen.

El plásmido CRISPR/Cas9 KO Selenoprotein P (bovine2) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen en líneas celulares bovine. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.

El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína Selenoprotein P.

Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en para la investigación de la señalización de Selenoprotein P, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.

Características principales

• sgRNA dirigidos a los exones de críticos para la función de Selenoprotein P
  Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
  Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
  Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de para mejorar la eficiencia del knockout
  Compatible con la administración mediante transfección

Variantes de diseño

CRISPRs +/- HDRs

• Los gRNA codificados por el plásmido Selenoprotein P CRISPR/Cas9 KO (bovine) y el plásmido Selenoprotein P CRISPR/Cas9 KO (bovine2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus . Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
  Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR Selenoprotein P (bovine) y el plásmido HDR Selenoprotein P (bovine2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.

Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.