Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
Plasmide Double Nickase (m) SDHA: sc-426283-NIC
- Espèces cibles: mouse
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (m) SDHA correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide SDHA Double Nickase (m) et le plasmide SDHA Double Nickase (m2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant Sdha. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
- Après transfection, l'efficacité de knockout de gène peut être évaluée par WB, IF ou IHC en utilisant l'anticorps: SDHA Antibody (F-2): sc-390381
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (m) SDHA | sc-426283-NIC | 20 µg | $410.00 |
Le gène murin **Sdha** code la sous-unité flavoprotéique de la succinate déshydrogénase (SDHA), un composant central du complexe II mitochondrial, qui relie le cycle de l’acide tricarboxylique à la chaîne de transport des électrons en catalysant l’oxydation du succinate en fumarate et en transférant les électrons vers l’ubiquinone. Par ce double rôle, SDHA contribue à réguler la phosphorylation oxydative, l’équilibre rédox mitochondrial et la bioénergétique cellulaire, avec des effets en aval sur les espèces réactives de l’oxygène et la signalisation métabolique. La perturbation du fonctionnement du complexe II est largement étudiée dans le contexte du remodelage métabolique, de la signalisation associée à l’hypoxie et des réponses au stress mitochondrial. Une activité altérée de SDHA est également pertinente dans des modèles de neurodégénérescence et de biologie tumorale, où l’on examine le dysfonctionnement mitochondrial et des réorientations métaboliques de type oncométabolite.
SDHA Le plasmide double nickase (m) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus Sdha dans les lignées cellulaires mouse. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de Sdha. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de Sdha. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de Sdha.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.