Plasmide Double Nickase (h) SCML2: sc-405003-NIC
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (h) SCML2 correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide SCML2 Double Nickase (h) et le plasmide SCML2 Double Nickase (h2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant SCML2. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
- Après transfection, l'efficacité de knockout de gène peut être évaluée par WB, IF ou IHC en utilisant l'anticorps: SCML2 Antibody (F-7): sc-271097
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (h) SCML2 | sc-405003-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plasmide Double Nickase (h2) SCML2 | sc-405003-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
SCML2 (sex comb on midleg-like 2) est une protéine du groupe Polycomb qui contribue à la régulation épigénétique de l’expression génique en se liant à la chromatine et en coordonnant des programmes de répression transcriptionnelle. Dans les cellules humaines, SCML2 est enrichie dans la lignée germinale mâle et participe à l’établissement d’états de chromatine favorables à la spermatogenèse, notamment via la régulation de l’expression des gènes méiotiques et des dynamiques de chromatine associées aux chromosomes sexuels. En modulant les voies liées à Polycomb et les paysages de modifications des histones, SCML2 influence les réseaux géniques du développement et les décisions d’identité cellulaire. Une altération de la fonction ou de l’expression de SCML2 a été associée à des défauts du développement des cellules germinales et a été étudiée dans le contexte d’un contrôle épigénétique dérégulé observé dans des programmes transcriptionnels liés aux cancers.
SCML2 Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus SCML2 dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de SCML2. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de SCML2. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de SCML2.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.