SCD5 Lentiviral Activation Particles (h2): sc-402860-LAC-2

Das humane SCD5 (Stearoyl‑CoA‑Desaturase 5) kodiert eine mit dem endoplasmatischen Retikulum assoziierte Δ9‑Desaturase, die gesättigte Fettsäure‑Acyl‑CoAs durch Einführung einer cis‑Doppelbindung in einfach ungesättigte Fettsäuren umwandelt und damit die Membranzusammensetzung, die Biologie von Lipidtröpfchen sowie die Biosynthese von Phospholipiden und Triacylglycerolen mitprägt. Durch die Regulation des Verhältnisses von gesättigten zu einfach ungesättigten Fettsäuren beeinflusst SCD5 die zelluläre Lipidhomöostase und metabolische Signalwege, die mit ER‑Stressantworten und der Redoxbalance verknüpft sind. Eine fehlregulierte SCD5‑Expression wird mit verändertem Lipidstoffwechsel in Stoffwechselerkrankungen sowie mit molekularen Phänotypen verschiedener Krebsarten in Verbindung gebracht, wobei Veränderungen der Desaturierung Proliferations‑ und Differenzierungsprogramme beeinflussen können. Geneditierung von SCD5 in humanen Zellmodellen ermöglicht mechanistische Untersuchungen der Fettsäuredesaturierung, des lipidomischen Remodelings und von Signalwegantworten auf Störungen der Membranlipidsättigung.

SCD5 Lentivirale Aktivierungspartikel (h2) erfüllen diesen Bedarf, indem sie das vollständige Transkriptionsaktivierungssystem des Synergistic Activation Mediator (SAM) in transduktionsbereite, hoch-titrige lentivirale Partikel verpacken und so eine effiziente SCD5-Hochregulation über ein breiteres Spektrum menschlicher Zelltypen ermöglichen.

SCD5 Lentivirale Aktivierungspartikel (h2) liefern alle funktionellen Komponenten des Synergistic Activation Mediator (SAM)-Systems über lentivirale Transduktion. Das System umfasst drei Partikelpräparate, die gemeinsam in Zielzellen transduziert werden: eines, das für katalytisch inaktives dCas9 (Mutationen D10A und N863A) kodiert, das mit der VP64-Transaktivierungsdomäne und einem Blasticidin-Resistenzgen fusioniert ist; eines, das für das MS2-p65-HSF1-Fusionsprotein mit einem Hygromycin-Resistenzgen kodiert; und eines, das für eine zielspezifische 20-nt-sgRNA kodiert, die an zwei MS2-RNA-Aptamere mit einem Puromycin-Resistenzgen fusioniert ist. Nach der lentiviralen Transduktion und der genomischen Integration der Expressionskassetten werden die SAM-Komponenten stabil exprimiert und lagern sich am Zielort innerhalb der proximalen Promotorregion stromaufwärts der SCD5-Transkriptionsstartstelle an, wo VP64, p65 und HSF1 kooperativ wirken, um endogene Transkriptionsmaschinerie zu rekrutieren und eine anhaltende Hochregulation der endogenen SCD5-Expression zu bewirken. Die Verwendung von nuklease-inaktivem dCas9 verhindert die Einführung von Doppelstrangbrüchen in der DNA und bewahrt den nativen SCD5-Genomlokus sowie die regulatorische Architektur.

Das lentivirale Format bietet mehrere praktische Vorteile: Die stabile genomische Integration unterstützt eine vererbbare Aktivierung über Zellteilungen hinweg; Partikelpräparate mit hohem Titer machen eine eigene Virusproduktion überflüssig; und die Kompatibilität mit primären, sich nicht teilenden und transfektionsresistenten Zelltypen erweitert die experimentellen Möglichkeiten. Eine erfolgreiche Transduktion kann durch eine dreifache Antibiotika-Selektion mit Puromycin, Hygromycin und Blasticidin bestätigt und verstärkt werden.

Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.