Plasmide Double Nickase (h) SAP 30L: sc-410126-NIC
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (h) SAP 30L correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide SAP 30L Double Nickase (h) et le plasmide SAP 30L Double Nickase (h2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant SAP30L. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (h) SAP 30L | sc-410126-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plasmide Double Nickase (h2) SAP 30L | sc-410126-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
SAP30L (de type SAP30) code un composant des complexes corépresseurs Sin3A/HDAC, qui relient des facteurs de transcription spécifiques de séquence à la désacétylation des histones et à la compaction de la chromatine. Par ces interactions, SAP30L contribue à réguler des programmes de répression transcriptionnelle impliqués dans le contrôle du cycle cellulaire, la différenciation et les réponses au stress cellulaire. Une régulation altérée du remodelage de la chromatine dépendant des HDAC et des complexes associés à Sin3 a été reliée à une dérégulation transcriptionnelle étendue observée dans le cancer et d’autres maladies où le contrôle épigénétique est perturbé. Par conséquent, SAP30L présente un intérêt pour disséquer la manière dont les complexes répresseurs façonnent les réseaux d’expression génique et les états de la chromatine dans les cellules humaines.
SAP 30L Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus SAP30L dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de SAP30L. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de SAP30L. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de SAP30L.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.