Plasmide Double Nickase (h) SAMHD1: sc-406002-NIC
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (h) SAMHD1 correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide SAMHD1 Double Nickase (h) et le plasmide SAMHD1 Double Nickase (h2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant SAMHD1. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (h) SAMHD1 | sc-406002-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plasmide Double Nickase (h2) SAMHD1 | sc-406002-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
SAMHD1 code une triphosphohydrolase des dNTP contenant un motif alpha stérile (SAM) et un domaine HD, qui régule les réserves intracellulaires de désoxynucléotides et contribue au maintien de la stabilité du génome pendant la réplication et la réparation de l’ADN. En contrôlant la disponibilité des dNTP et en participant à la signalisation de la réponse aux dommages de l’ADN, SAMHD1 influence la progression du cycle cellulaire, la tolérance au stress réplicatif et des voies de l’immunité innée liées à la détection des acides nucléiques. SAMHD1 est également impliquée dans la restriction par l’hôte des rétroéléments et de la réplication virale via la modulation du métabolisme des nucléotides et de la signalisation immunitaire déclenchée par les acides nucléiques. Une activité dérégulée de SAMHD1 a été associée à des interféronopathies inflammatoires et a été étudiée en contexte cancéreux, où une homéostasie des dNTP altérée et le stress réplicatif contribuent à l’instabilité génomique.
SAMHD1 Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus SAMHD1 dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de SAMHD1. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de SAMHD1. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de SAMHD1.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.