Plasmide Double Nickase (h) Sall4: sc-401033-NIC
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (h) Sall4 correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide Sall4 Double Nickase (h) et le plasmide Sall4 Double Nickase (h2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant SALL4. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
- Après transfection, l'efficacité de knockout de gène peut être évaluée par WB, IF ou IHC en utilisant l'anticorps: Sall4 Antibody (G-3): sc-166033
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (h) Sall4 | sc-401033-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plasmide Double Nickase (h2) Sall4 | sc-401033-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
SALL4 code pour Sall4, un facteur de transcription à doigts de zinc de type C2H2 qui contribue au maintien de la pluripotence et régule les programmes d’expression génique précoces du développement, notamment les réseaux contrôlant l’auto-renouvellement, l’engagement de lignée et l’état de la chromatine. Sall4 coordonne les circuits transcriptionnels avec des facteurs tels qu’OCT4 et NANOG et interagit avec des régulateurs épigénétiques afin de moduler l’activité des enhancers et des promoteurs au cours de l’embryogenèse. Dans les contextes somatiques, une expression dérégulée de SALL4 est associée à une différenciation altérée et à des signalisations prolifératives, et a été rapportée dans de multiples cancers, ce qui en fait un nœud utile pour étudier le remodelage transcriptionnel oncogénique. La perturbation génétique de SALL4 permet des investigations mécanistiques en biologie des cellules souches, sur les transitions de destin cellulaire et sur les réseaux de régulation génique pilotés par des facteurs de transcription.
Sall4 Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus SALL4 dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de SALL4. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de SALL4. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de SALL4.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.