Pas de données CRISPR : l'image illustre la qualité de l'anticorps pour la visualisation des résultats de l'expérience CRISPR.
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Plasmide CRISPR/Cas9 KO SA-2 (h): sc-401222
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- SA-2 Le plasmide CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h) est un ensemble de plasmides, chacun codant pour la nucléase Cas9 et un ARN guide (gRNA) de 20 nt spécifique à la cible, conçu pour une efficacité de knockout maximale à l'aide de séquences issues de la bibliothèque GeCKO v2
- Les séquences d'ARN guide (gRNA) dirigent Cas9 pour induire des cassures double brin (DSB) spécifiques au site dans le locus génomique SA-2, entraînant un knock-out génique par jonction non homologue (NHEJ)
- Les gènes de résistance à la puromycine et RFP sont flanqués de sites LoxP, permettant la suppression des marqueurs de sélection via la recombinase Cre (Cre Vector : sc-418923) après l'établissement de lignées cellulaires knock-out stables
- Après transfection, l'efficacité de knockout de gène peut être évaluée par WB, IF ou IHC en utilisant l'anticorps: SA-2 Antibody (G-12): sc-398229
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide CRISPR/Cas9 KO SA-2 (h) | sc-401222 | 20 µg | $397.00 |
Présentation
STAG2 code pour la sous-unité humaine SA-2 de la cohésine, un composant central du complexe de cohésine qui assure la cohésion des chromatides sœurs et l’organisation du génome à un niveau supérieur. SA-2 favorise une ségrégation fidèle des chromosomes lors de la mitose et de la méiose, contribue à la réparation des cassures double brin de l’ADN et participe à la régulation des interactions à longue distance entre enhancers et promoteurs qui façonnent les programmes transcriptionnels. Par ces fonctions, STAG2 s’inscrit au carrefour du contrôle du cycle cellulaire, des réponses au stress réplicatif et des voies liées à l’architecture de la chromatine. L’altération de STAG2 est fréquemment observée en génomique des cancers et est associée à l’instabilité chromosomique ainsi qu’à une dérégulation de l’expression génique, ce qui en fait un locus largement étudié dans la recherche sur le maintien du génome.
Le plasmide CRISPR/Cas9 KO SA-2 (h) est un ensemble de plasmides conçus pour la disruption ciblée du gène STAG2 dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide co-exprime un ARN guide unique (sgRNA) ciblant un site distinct au sein du STAG2, ainsi que la nucléase Cas9 de Streptococcus pyogenes. Les plasmides codent également pour la GFP, ce qui permet l'identification par fluorescence et l'enrichissement des cellules transfectées avec succès par microscopie à fluorescence ou cytométrie en flux.
La conception multi-guide augmente la probabilité de générer des insertions ou des délétions (indels) qui perturbent le cadre de lecture ouvert STAG2 à la suite de la formation de cassures double brin médiées par Cas9. Les cassures d'ADN introduites par le système CRISPR/Cas9 sont réparées par des voies endogènes de jonction non homologue (NHEJ), ce qui entraîne fréquemment des mutations par décalage du cadre de lecture qui suppriment l'expression de la protéine SA-2.
Ce système de knock-out CRISPR permet la génération efficace de modèles cellulaires déficients en STAG2 pour l'étude de la signalisation de SA-2, les études de génomique fonctionnelle, la recherche en biologie du cancer et l'évaluation des réponses thérapeutiques dans des lignées cellulaires humaines.
Caractéristiques principales
- sgRNA ciblant le ou les exons de STAG2 essentiels à la fonction de SA-2
Co-expression de SpCas9 et de sgRNA à partir d'un seul plasmide pour une administration simplifiée
Rapporteur GFP pour l'identification des cellules transfectées
Pool de plasmides ciblant plusieurs sites génomiques de STAG2 pour améliorer l'efficacité du knock-out
Compatible avec l'administration par transfection
Variantes de conception
CRISPR +/- HDR
- Les gRNA codés par le SA-2 plasmide CRISPR/Cas9 KO (h) et le SA-2 plasmide CRISPR/Cas9 KO (h2) ciblent des sites distincts au sein du locus STAG2. Une ou les deux conceptions de ciblage peuvent être disponibles. Voir les produits associés pour connaître la disponibilité.
Les constructions donneuses HDR codées par le SA-2 plasmide HDR (h) et le SA-2 (h2) contiennent une cassette de résistance à la puromycine et un rapporteur RFP flanqué de bras d'homologie STAG2 pour permettre la réparation dirigée par homologie au niveau de sites cibles STAG2 définis correspondant aux conceptions CRISPR/Cas9 KO. La disponibilité des donneurs HDR peut varier. Voir les produits associés pour connaître la disponibilité.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.