S-100A5 Lentiviral Activation Particles (h): sc-418401-LAC

Humanes S100A5 kodiert S-100A5, ein Ca2+-bindendes EF-Hand-Protein der S100-Familie, das als Calciumsensor wirkt und Protein-Protein-Interaktionen sowie zellzustandsabhängige Signalübertragung moduliert. S-100A5 ist mit calciumregulierten Prozessen wie Zytoskelettorganisation, Membrandynamik und Transkriptionsantworten verknüpft, was zur breiteren Beteiligung von S100-Proteinen in der neuronalen und epithelialen Biologie passt. Veränderte Expressionsmuster der S100-Familie wurden mit entzündungsassoziierter Signalgebung und krebsrelevanten Signalwegen wie MAPK und NF-κB in Verbindung gebracht, wodurch S100A5 ein nützlicher Marker und mechanistischer Knotenpunkt für Studien zu zellulären Stressantworten und Differenzierungsprogrammen ist. Seine kontextabhängige Expression unterstützt Anwendungen zur Untersuchung von Linienspezifikation, Signalintegration und Pathway-Rewiring in krankheitsrelevanten Modellen.

S-100A5 Lentivirale Aktivierungspartikel (h) erfüllen diesen Bedarf, indem sie das vollständige Transkriptionsaktivierungssystem des Synergistic Activation Mediator (SAM) in transduktionsbereite, hoch-titrige lentivirale Partikel verpacken und so eine effiziente S100A5-Hochregulation über ein breiteres Spektrum menschlicher Zelltypen ermöglichen.

S-100A5 Lentivirale Aktivierungspartikel (h) liefern alle funktionellen Komponenten des Synergistic Activation Mediator (SAM)-Systems über lentivirale Transduktion. Das System umfasst drei Partikelpräparate, die gemeinsam in Zielzellen transduziert werden: eines, das für katalytisch inaktives dCas9 (Mutationen D10A und N863A) kodiert, das mit der VP64-Transaktivierungsdomäne und einem Blasticidin-Resistenzgen fusioniert ist; eines, das für das MS2-p65-HSF1-Fusionsprotein mit einem Hygromycin-Resistenzgen kodiert; und eines, das für eine zielspezifische 20-nt-sgRNA kodiert, die an zwei MS2-RNA-Aptamere mit einem Puromycin-Resistenzgen fusioniert ist. Nach der lentiviralen Transduktion und der genomischen Integration der Expressionskassetten werden die SAM-Komponenten stabil exprimiert und lagern sich am Zielort innerhalb der proximalen Promotorregion stromaufwärts der S100A5-Transkriptionsstartstelle an, wo VP64, p65 und HSF1 kooperativ wirken, um endogene Transkriptionsmaschinerie zu rekrutieren und eine anhaltende Hochregulation der endogenen S-100A5-Expression zu bewirken. Die Verwendung von nuklease-inaktivem dCas9 verhindert die Einführung von Doppelstrangbrüchen in der DNA und bewahrt den nativen S100A5-Genomlokus sowie die regulatorische Architektur.

Das lentivirale Format bietet mehrere praktische Vorteile: Die stabile genomische Integration unterstützt eine vererbbare Aktivierung über Zellteilungen hinweg; Partikelpräparate mit hohem Titer machen eine eigene Virusproduktion überflüssig; und die Kompatibilität mit primären, sich nicht teilenden und transfektionsresistenten Zelltypen erweitert die experimentellen Möglichkeiten. Eine erfolgreiche Transduktion kann durch eine dreifache Antibiotika-Selektion mit Puromycin, Hygromycin und Blasticidin bestätigt und verstärkt werden.

Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.