Plasmide Double Nickase (h) Ron β: sc-400489-NIC
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (h) Ron β correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide Ron β Double Nickase (h) et le plasmide Ron β Double Nickase (h2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant MST1R. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
- Après transfection, l'efficacité de knockout de gène peut être évaluée par WB, IF ou IHC en utilisant l'anticorps: Ron α Antibody (C-5): sc-393523
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (h) Ron β | sc-400489-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plasmide Double Nickase (h2) Ron β | sc-400489-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
MST1R code la tyrosine kinase réceptrice RON (également appelée récepteur 1 du macrophage-stimulating protein), un membre de la famille MET qui transmet les signaux du macrophage-stimulating protein (MSP). Une fois activé, RON engage des voies en aval telles que PI3K–AKT, RAS–MAPK et la signalisation STAT afin de réguler la survie et la migration des cellules épithéliales, ainsi que des programmes associés à la réparation des plaies, et il peut moduler la polarisation des macrophages et les réponses inflammatoires. Des altérations de la signalisation MST1R/RON ont été associées à une dérégulation des phénotypes de motilité et d’invasion cellulaires et à des modifications du dialogue entre la tumeur et son microenvironnement dans de multiples contextes oncologiques. L’isoforme Ron bêta constitue une variante biologiquement pertinente pour disséquer des sorties de signalisation spécifiques d’isoforme et les interactions entre récepteurs au sein des réseaux de la famille MET.
Ron β Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus MST1R dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de MST1R. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de MST1R. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de MST1R.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.