Pas de données CRISPR : l'image illustre la qualité de l'anticorps pour la visualisation des résultats de l'expérience CRISPR.
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Plasmide CRISPR/Cas9 KO robo2 (m): sc-435289
- Espèces cibles: mouse
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- robo2 Le plasmide CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (m) est un ensemble de plasmides, chacun codant pour la nucléase Cas9 et un ARN guide (gRNA) de 20 nt spécifique à la cible, conçu pour une efficacité de knockout maximale à l'aide de séquences issues de la bibliothèque GeCKO v2
- Les séquences d'ARN guide (gRNA) dirigent Cas9 pour induire des cassures double brin (DSB) spécifiques au site dans le locus génomique robo2, entraînant un knock-out génique par jonction non homologue (NHEJ)
- Les gènes de résistance à la puromycine et RFP sont flanqués de sites LoxP, permettant la suppression des marqueurs de sélection via la recombinase Cre (Cre Vector : sc-418923) après l'établissement de lignées cellulaires knock-out stables
- Après transfection, l'efficacité de knockout de gène peut être évaluée par WB, IF ou IHC en utilisant l'anticorps: robo2 Antibody (A-10): sc-376177
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide CRISPR/Cas9 KO robo2 (m) | sc-435289 | 20 µg | $397.00 |
Présentation
ROBO2 (récepteur 2 d’orientation de type Roundabout) code un récepteur transmembranaire de l’axe de signalisation SLIT/ROBO, qui régule le guidage des axones, la migration neuronale et la morphogenèse des tissus via le remodelage du cytosquelette et le mouvement directionnel des cellules. Chez la souris, la fonction de robo2 est liée au développement du système nerveux et de multiples structures épithéliales, avec des effets en aval sur des voies contrôlant la polarité cellulaire, l’adhérence et les signaux de guidage répulsifs. Une activité ROBO2 altérée a été associée à des anomalies congénitales du développement et à des phénotypes de migration cellulaire dérégulée, ce qui en fait une cible pertinente pour des études mécanistiques du neurodéveloppement et de l’organogenèse. Sa signalisation interfère avec des processus dépendants des GTPases de la famille Rho, qui modèlent la dynamique du cône de croissance et le positionnement cellulaire coordonné.
Le plasmide CRISPR/Cas9 KO robo2 (m) est un ensemble de plasmides conçus pour la disruption ciblée du gène Robo2 dans les lignées cellulaires mouse. Chaque plasmide co-exprime un ARN guide unique (sgRNA) ciblant un site distinct au sein du Robo2, ainsi que la nucléase Cas9 de Streptococcus pyogenes. Les plasmides codent également pour la GFP, ce qui permet l'identification par fluorescence et l'enrichissement des cellules transfectées avec succès par microscopie à fluorescence ou cytométrie en flux.
La conception multi-guide augmente la probabilité de générer des insertions ou des délétions (indels) qui perturbent le cadre de lecture ouvert Robo2 à la suite de la formation de cassures double brin médiées par Cas9. Les cassures d'ADN introduites par le système CRISPR/Cas9 sont réparées par des voies endogènes de jonction non homologue (NHEJ), ce qui entraîne fréquemment des mutations par décalage du cadre de lecture qui suppriment l'expression de la protéine robo2.
Ce système de knock-out CRISPR permet la génération efficace de modèles cellulaires déficients en Robo2 pour l'étude de la signalisation de robo2, les études de génomique fonctionnelle, la recherche en biologie du cancer et l'évaluation des réponses thérapeutiques dans des lignées cellulaires humaines.
Caractéristiques principales
- sgRNA ciblant le ou les exons de Robo2 essentiels à la fonction de robo2
Co-expression de SpCas9 et de sgRNA à partir d'un seul plasmide pour une administration simplifiée
Rapporteur GFP pour l'identification des cellules transfectées
Pool de plasmides ciblant plusieurs sites génomiques de Robo2 pour améliorer l'efficacité du knock-out
Compatible avec l'administration par transfection
Variantes de conception
CRISPR +/- HDR
- Les gRNA codés par le robo2 plasmide CRISPR/Cas9 KO (m) et le robo2 plasmide CRISPR/Cas9 KO (m2) ciblent des sites distincts au sein du locus Robo2. Une ou les deux conceptions de ciblage peuvent être disponibles. Voir les produits associés pour connaître la disponibilité.
Les constructions donneuses HDR codées par le robo2 plasmide HDR (m) et le robo2 (m2) contiennent une cassette de résistance à la puromycine et un rapporteur RFP flanqué de bras d'homologie Robo2 pour permettre la réparation dirigée par homologie au niveau de sites cibles Robo2 définis correspondant aux conceptions CRISPR/Cas9 KO. La disponibilité des donneurs HDR peut varier. Voir les produits associés pour connaître la disponibilité.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.