Plasmide Double Nickase (h) RNF146: sc-417152-NIC
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (h) RNF146 correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide RNF146 Double Nickase (h) et le plasmide RNF146 Double Nickase (h2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant RNF146. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (h) RNF146 | sc-417152-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plasmide Double Nickase (h2) RNF146 | sc-417152-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
RNF146 code une ligase E3 de l’ubiquitine (également appelée Iduna) qui reconnaît la poly(ADP-ribose) et couple les signaux dépendants de PARP à la dégradation protéasomale médiée par l’ubiquitine. Elle participe aux voies de réponse aux dommages de l’ADN et au stress de réplication en favorisant la dégradation de substrats PARylés tels qu’Axin, s’articulant ainsi avec la signalisation Wnt/β-caténine et l’homéostasie cellulaire. Via la régulation de programmes de mort cellulaire liés à la PARylation et le maintien du génome, RNF146 est étudiée dans des contextes de remodelage de voies associées au cancer et de réponses au stress liées à la neurodégénérescence. Son activité relie la signalisation PARP, la dynamique ubiquitine‑protéasome et des programmes transcriptionnels qui influencent la prolifération et la survie.
RNF146 Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus RNF146 dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de RNF146. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de RNF146. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de RNF146.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.