Não são dados CRISPR: a imagem ilustra a qualidade do anticorpo para visualizar os resultados da experiência CRISPR.
Não são dados CRISPR: a imagem ilustra a qualidade do anticorpo para visualizar os resultados da experiência CRISPR.
RIG-I Plasmídeo duplo de Nickase (m): sc-432915-NIC
- alvos específicos: mouse
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- RIG-IO plasmídeo de dupla Nickase (m) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase RIG-I (m) e o Plasmídeo Double Nickase RIG-I (m2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para Ddx58. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:RIG-I Anticorpo (D-12): sc-376845
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
RIG-I Plasmídeo duplo de Nickase (m) | sc-432915-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
RIG-I Plasmídeo duplo de Nickase (m2) | sc-432915-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
O gene Ddx58 de camundongo codifica o RIG-I, uma helicase de RNA citosólica da família DExD/H-box que atua como receptor de reconhecimento de padrões para espécies de RNA viral com extremidades 5′-trifosfato e pequenos trechos de RNA de dupla fita. A ligação do ligante desencadeia ativação conformacional e sinalização via MAVS, promovendo as vias de TBK1/IKKε e IRF3/IRF7, bem como a via de NF-κB, para induzir programas gênicos de interferon tipo I e de inflamação. A atividade do RIG-I molda a comunicação cruzada da imunidade inata com a apresentação de antígenos, redes de citocinas e a restrição antiviral intrínseca à célula. A desregulação da sinalização de Ddx58/RIG-I está implicada em respostas aberrantes de interferon e fenótipos associados à inflamação, sustentando estudos mecanísticos de homeostase imunológica e biologia de infecções em sistemas murinos.
RIG-I O Plasmídeo de Nickase Dupla (m) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus Ddx58 em linhas celulares mouse. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de Ddx58. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função Ddx58. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com Ddx58 interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.