Plasmide Double Nickase (h) Ribosomal Protein L24: sc-417652-NIC
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (h) Ribosomal Protein L24 correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide Ribosomal Protein L24 Double Nickase (h) et le plasmide Ribosomal Protein L24 Double Nickase (h2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant RPL24. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
- Après transfection, l'efficacité de knockout de gène peut être évaluée par WB, IF ou IHC en utilisant l'anticorps: Ribosomal Protein L24 Antibody (C-5): sc-518250
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (h) Ribosomal Protein L24 | sc-417652-NIC | 20 µg | $410.00 |
RPL24 code pour la protéine ribosomique L24, un composant essentiel de la grande sous-unité ribosomique 60S, qui contribue à l’assemblage des ribosomes et au contrôle de la traduction. En soutenant la capacité de décodage des ARNm et la synthèse des polypeptides naissants, RPL24 influence des processus fondamentaux tels que la croissance cellulaire, la protéostasie et des programmes de traduction adaptatifs au stress. La perturbation des protéines ribosomiques peut déclencher un stress nucléolaire et activer des voies de surveillance, notamment la signalisation p53, reliant ainsi les défauts de biogenèse ribosomique à une régulation altérée du cycle cellulaire. Une production de ribosomes et une traduction dérégulées sont largement impliquées dans la transformation oncogénique et des phénotypes de type ribosomopathie, ce qui fait de RPL24 un nœud pertinent pour des études mécanistiques du contrôle traductionnel dans les cellules humaines.
Ribosomal Protein L24 Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus RPL24 dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de RPL24. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de RPL24. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de RPL24.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.