Ribosomal Protein L22L1 CRISPR/Cas9 KO Plasmid (h): sc-402323

Übersicht

RPL22L1 kodiert das ribosomale Protein L22L1, eine Komponente der großen 60S‑Ribosomenuntereinheit, die die Ribosomenbiogenese und eine effiziente mRNA-Translation unterstützt. Über seinen Beitrag zur translationalen Kontrolle kann RPL22L1 die Proteostase, die Zellzyklusprogression und stressadaptive Programme beeinflussen, die von selektiver mRNA-Rekrutierung und der Ribosomenfunktion abhängen. Eine veränderte Regulation ribosomaler Proteine und von Faktoren der Ribosomenassemblierung ist häufig mit entgleisten Wachstumsprogrammen und Signalwegen der Genomstabilität verknüpft, wodurch RPL22L1 für Studien zu ribosomenassoziierten Verwundbarkeiten in proliferativen Zuständen relevant ist. Dieses Gen ist daher für mechanistische Arbeiten interessant, die die translatorische Kapazität mit zellulärer Homöostase und krankheitsassoziierten Phänotypen in Verbindung bringen.

Das Ribosomal Protein L22L1 CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (h) ist ein Pool von Plasmiden, die für die gezielte Disruption des RPL22L1-Gens in human-Zelllinien entwickelt wurden. Jedes Plasmid koexprimiert eine einzigartige Single-Guide-RNA (sgRNA), die auf eine bestimmte Stelle innerhalb des RPL22L1-Gens abzielt, zusammen mit der Streptococcus pyogenes Cas9-Nuklease. Die Plasmide kodieren zudem für GFP, was die fluoreszente Identifizierung und Anreicherung erfolgreich transfizierter Zellen mittels Fluoreszenzmikroskopie oder Durchflusszytometrie ermöglicht.

Das Multi-Guide-Design erhöht die Wahrscheinlichkeit, dass Insertionen oder Deletionen (Indels) entstehen, die den offenen Leserahmen von RPL22L1 nach der Cas9-vermittelten Bildung von Doppelstrangbrüchen unterbrechen. Durch das CRISPR/Cas9-System verursachte DNA-Brüche werden über endogene NHEJ-Wege (Non-Homologous End Joining) repariert, was häufig zu Frameshift-Mutationen führt, die die Ribosomal Protein L22L1-Proteinexpression aufheben.

Dieses CRISPR-Knockout-System ermöglicht die effiziente Erzeugung von RPL22L1-defizienten Zellmodellen zur Untersuchung der Ribosomal Protein L22L1-Signalübertragung, für funktionelle Genomstudien, in der Krebsbiologieforschung sowie zur Bewertung therapeutischer Reaktionen in menschlichen Zelllinien.

Hauptmerkmale

• sgRNAs, die auf RPL22L1-Exone abzielen, die für die Ribosomal Protein L22L1-Funktion entscheidend sind
  Ko-Expression von SpCas9 und sgRNA aus einem einzigen Plasmid zur vereinfachten Verabreichung
  GFP-Reporter zur Identifizierung transfizierter Zellen
  Pool von Plasmiden, die auf mehrere RPL22L1-Genomstellen abzielen, um die Knockout-Effizienz zu verbessern
  Kompatibel mit der Verabreichung durch Transfektion

Designvarianten

CRISPRs +/- HDRs

• gRNAs, die vom Ribosomal Protein L22L1 CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (h) und vom Ribosomal Protein L22L1 CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (h2) kodiert werden, zielen auf unterschiedliche Stellen innerhalb des RPL22L1-Lokus ab. Es kann ein oder beide Targeting-Designs verfügbar sein. Siehe „Verwandte Produkte“ für Verfügbarkeit.
  HDR-Donorkonstrukte, kodiert durch das Ribosomal Protein L22L1 HDR-Plasmid (h) und Ribosomal Protein L22L1 HDR-Plasmid (h2) kodiert, enthalten eine Puromycin-Resistenzkassette und einen RFP-Reporter, flankiert von RPL22L1-Homologiearmen, um die homologe Reparatur an definierten RPL22L1-Zielstellen entsprechend den CRISPR/Cas9-KO-Designs zu unterstützen. Die Verfügbarkeit von HDR-Donoren kann variieren. Siehe „Verwandte Produkte“ für Verfügbarkeit.

Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.