Plasmide CRISPR/Cas9 KO Ribosomal Protein L22L1 (h): sc-402323

Présentation

RPL22L1 code la protéine ribosomique L22L1, un composant de la grande sous-unité ribosomique 60S qui soutient la biogenèse des ribosomes et une traduction efficace des ARNm. Par sa contribution au contrôle traductionnel, RPL22L1 peut influencer la protéostasie, la progression du cycle cellulaire et les programmes d’adaptation au stress qui dépendent du recrutement sélectif des ARNm et du bon fonctionnement des ribosomes. Une régulation altérée des protéines ribosomiques et des facteurs d’assemblage des ribosomes est fréquemment associée à des programmes de croissance dérégulés et à des voies de maintien du génome, ce qui rend RPL22L1 pertinent pour l’étude des vulnérabilités liées aux ribosomes dans des états prolifératifs. Ce gène présente donc un intérêt pour des travaux mécanistiques reliant la capacité de traduction à l’homéostasie cellulaire et à des phénotypes associés aux maladies.

Le plasmide CRISPR/Cas9 KO Ribosomal Protein L22L1 (h) est un ensemble de plasmides conçus pour la disruption ciblée du gène RPL22L1 dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide co-exprime un ARN guide unique (sgRNA) ciblant un site distinct au sein du RPL22L1, ainsi que la nucléase Cas9 de Streptococcus pyogenes. Les plasmides codent également pour la GFP, ce qui permet l'identification par fluorescence et l'enrichissement des cellules transfectées avec succès par microscopie à fluorescence ou cytométrie en flux.

La conception multi-guide augmente la probabilité de générer des insertions ou des délétions (indels) qui perturbent le cadre de lecture ouvert RPL22L1 à la suite de la formation de cassures double brin médiées par Cas9. Les cassures d'ADN introduites par le système CRISPR/Cas9 sont réparées par des voies endogènes de jonction non homologue (NHEJ), ce qui entraîne fréquemment des mutations par décalage du cadre de lecture qui suppriment l'expression de la protéine Ribosomal Protein L22L1.

Ce système de knock-out CRISPR permet la génération efficace de modèles cellulaires déficients en RPL22L1 pour l'étude de la signalisation de Ribosomal Protein L22L1, les études de génomique fonctionnelle, la recherche en biologie du cancer et l'évaluation des réponses thérapeutiques dans des lignées cellulaires humaines.

Caractéristiques principales

• sgRNA ciblant le ou les exons de RPL22L1 essentiels à la fonction de Ribosomal Protein L22L1
  Co-expression de SpCas9 et de sgRNA à partir d'un seul plasmide pour une administration simplifiée
  Rapporteur GFP pour l'identification des cellules transfectées
  Pool de plasmides ciblant plusieurs sites génomiques de RPL22L1 pour améliorer l'efficacité du knock-out
  Compatible avec l'administration par transfection

Variantes de conception

CRISPR +/- HDR

• Les gRNA codés par le Ribosomal Protein L22L1 plasmide CRISPR/Cas9 KO (h) et le Ribosomal Protein L22L1 plasmide CRISPR/Cas9 KO (h2) ciblent des sites distincts au sein du locus RPL22L1. Une ou les deux conceptions de ciblage peuvent être disponibles. Voir les produits associés pour connaître la disponibilité.
  Les constructions donneuses HDR codées par le Ribosomal Protein L22L1 plasmide HDR (h) et le Ribosomal Protein L22L1 (h2) contiennent une cassette de résistance à la puromycine et un rapporteur RFP flanqué de bras d'homologie RPL22L1 pour permettre la réparation dirigée par homologie au niveau de sites cibles RPL22L1 définis correspondant aux conceptions CRISPR/Cas9 KO. La disponibilité des donneurs HDR peut varier. Voir les produits associés pour connaître la disponibilité.

Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.