Rho GAP p190-B Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-405755-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- Rho GAP p190-BO plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase Rho GAP p190-B (h) e o Plasmídeo Double Nickase Rho GAP p190-B (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para ARHGAP5. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:Rho GAP p190-B Anticorpo (G-11): sc-393241
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
Rho GAP p190-B Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-405755-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Rho GAP p190-B Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-405755-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
ARHGAP5 codifica a proteína ativadora de GTPase Rho p190-B, um importante regulador negativo das GTPases da família Rho que acelera a hidrólise de GTP para conter a sinalização dependente de RhoA. Por meio da modulação da dinâmica do citoesqueleto de actina, da renovação das adesões focais e da contratilidade, a p190-B influencia a forma celular, a adesão, a migração e a citocinese, integrando sinais provenientes de integrinas e de vias de fatores de crescimento. A atividade de ARHGAP5 impacta efetores a jusante como ROCK e a fosforilação da cadeia leve de miosina, conectando a sinalização de Rho à mecanotransdução e a programas de motilidade celular. A desregulação da sinalização de GTPases Rho envolvendo ARHGAP5 tem sido associada a comportamento invasivo alterado e a remodelamento tecidual aberrante no câncer e em outras patologias caracterizadas por desequilíbrio do citoesqueleto.
Rho GAP p190-B O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus ARHGAP5 em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de ARHGAP5. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função ARHGAP5. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com ARHGAP5 interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.