Plásmido Doble Nickase (m) RGS7: sc-423946-NIC
- Especies Diana: mouse
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- El Plásmido Double Nickase (m)RGS7 consisten en un par de plásmidos cada uno codificando una nucleasa Cas9 mutada D10A y una guia de ARN de 20 nucleótidos (gRNA) diseñados para una mayor especificidad que el homologo CRISPR/Cas9 KO
- Las secuencias de gRNA tienen una diferencia de unas 20 pb para permitir un corte doble mediado por Cas9 en el ADN que imita el doble corte
- Uno de los plásmidos contiene el gen de resistencia a puromicina para la selección y el otro el marcado GFP para confirmar visualmente la transfección
- El plásmido de doble nickasa RGS7 (m) y el plásmido de doble nickasa RGS7 (m2) codifican diseños distintos de pares de gRNA dirigidos a Rgs7. Puede que esté disponible uno o ambos diseños
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
Plásmido Doble Nickase (m) RGS7 | sc-423946-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plásmido Doble Nickase (m2) RGS7 | sc-423946-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
Rgs7 codifica el Regulador de la Señalización de Proteínas G 7 (RGS7), una proteína activadora de la GTPasa enriquecida en neuronas que acelera la actividad de las subunidades Gαi/o y relacionadas para terminar la señalización mediada por receptores acoplados a proteína G (GPCR). Al moldear la cinética y la amplitud de las vías evocadas por neurotransmisores, RGS7 modula salidas de segundos mensajeros, entre ellas cAMP/PKA, y la regulación posterior de canales iónicos que influyen en la excitabilidad neuronal y la transmisión sináptica. RGS7 actúa dentro de complejos macromoleculares con Gβ5 y anclajes de membrana como R7BP para controlar su localización y el sesgo de señalización a través de los circuitos neuronales. La desregulación de la temporización de la señalización de GPCR mediada por proteínas de la familia RGS es relevante para estudios de fenotipos neuroconductuales y de mecanismos a nivel de circuito implicados en la biología de enfermedades neurológicas y psiquiátricas.
RGS7 El plásmido de doble nicasa (m) consiste en un par de plásmidos emparejados diseñados para la edición de alta especificidad del locus Rgs7 en líneas celulares mouse. Cada plásmido expresa una nicasa Cas9 D10A y un ARN guía específico (sgRNA) dirigido a cadenas de ADN opuestas dentro de Rgs7. Cuando se dirigen a sitios adyacentes en cadenas de ADN opuestas, las dos nicasas generan cortes en cadena simple desplazados que, juntos, producen una rotura de doble cadena escalonada, lo que requiere una actividad coordinada sobre el objetivo por parte de ambas guías. La rotura de ADN resultante se resuelve mediante vías de reparación celular endógenas, más comúnmente a través de la unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que da lugar a inserciones o deleciones que alteran la función de Rgs7. Al requerir la participación de dos ARN guía en el locus diana, el enfoque de doble corte mejora la especificidad de la edición y proporciona una estrategia CRISPR complementaria para aplicaciones en las que se desea un control adicional sobre la precisión de la orientación.
Para facilitar la identificación eficiente de las células editadas, un plásmido codifica GFP para la visualización fluorescente de las poblaciones transfectadas, mientras que el plásmido complementario lleva un gen de resistencia a la puromicina para la selección con antibióticos. En conjunto, estas características facilitan el enriquecimiento eficiente de las poblaciones cotransfectadas y simplifican la validación de los clones con Rgs7 alterado.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.