Plasmide Double Nickase (m) RGS7: sc-423946-NIC
- Espèces cibles: mouse
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (m) RGS7 correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide RGS7 Double Nickase (m) et le plasmide RGS7 Double Nickase (m2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant Rgs7. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (m) RGS7 | sc-423946-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plasmide Double Nickase (m2) RGS7 | sc-423946-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
Rgs7 code pour le régulateur de la signalisation des protéines G 7 (RGS7), une protéine neuronale enrichie, activatrice de l’activité GTPase, qui accélère l’inactivation des sous-unités Gαi/o et apparentées afin de mettre fin à la signalisation des GPCR (récepteurs couplés aux protéines G). En modulant la cinétique et l’amplitude des voies déclenchées par les neurotransmetteurs, RGS7 influence des sorties de seconds messagers, notamment la voie AMPc/PKA, ainsi que la régulation en aval des canaux ioniques, qui affectent l’excitabilité neuronale et la transmission synaptique. RGS7 agit au sein de complexes macromoléculaires avec Gβ5 et des ancrages membranaires tels que R7BP, afin de contrôler sa localisation et le biais de signalisation au sein des circuits neuronaux. Un dérèglement de la temporalité des signaux GPCR médié par les protéines de la famille RGS est pertinent pour l’étude de phénotypes neurocomportementaux et de mécanismes au niveau des circuits impliqués dans la biologie des maladies neurologiques et psychiatriques.
RGS7 Le plasmide double nickase (m) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus Rgs7 dans les lignées cellulaires mouse. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de Rgs7. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de Rgs7. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de Rgs7.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.