Não são dados CRISPR: a imagem ilustra a qualidade do anticorpo para visualizar os resultados da experiência CRISPR.
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RGS4 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h): sc-418013
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- RGS4 O Plasmídeo CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h) é um conjunto de plasmídeos, cada um codificando a nuclease Cas9 e um RNA guia (gRNA) de 20 nt específico para o alvo, concebido para uma eficiência máxima de knockout utilizando sequências derivadas da biblioteca GeCKO v2
- As sequências de gRNA direcionam a Cas9 para induzir quebras de cadeia dupla (DSBs) específicas do local no locus genómico RGS4, resultando no knockout do gene através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ)
- Os genes de resistência à puromicina e RFP são flanqueados por sítios LoxP, permitindo a remoção de marcadores de seleção através da recombinase Cre (Cre Vector: sc-418923) após o estabelecimento de linhas celulares knockout estáveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:RGS4 Anticorpo (H-12): sc-398348
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
RGS4 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) | sc-418013 | 20 µg | $397.00 |
Visão geral
RGS4 codifica o Regulador da Sinalização de Proteínas G 4, uma proteína ativadora de GTPase que acelera o término da sinalização mediada por GPCR ao promover a hidrólise de GTP na subunidade Gα. Ao restringir vias downstream de segundos mensageiros, como a sinalização cAMP/PKA e PLCβ/Ca2+, o RGS4 influencia a dessensibilização de receptores, a excitabilidade neuronal e as respostas transcricionais dependentes de estímulo. É expresso em vários tecidos, com funções particularmente relevantes no sistema nervoso, e tem sido associado à modulação da sinalização sináptica e a processos de neurodesenvolvimento. Alterações na expressão de RGS4 e no equilíbrio de sua sinalização têm sido relacionadas a fenótipos neuropsiquiátricos e cognitivos, tornando-o relevante para estudos mecanísticos da regulação de vias de GPCR.
O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO RGS4 (h) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene RGS4 em linhas celulares human. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do RGS4, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.
O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do RGS4 na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína RGS4.
Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de RGS4 para a investigação da sinalização de RGS4, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.
Características principais
- sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) RGS4 críticos para a função RGS4
Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
Repórter GFP para identificação de células transfectadas
Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos RGS4 para melhorar a eficiência do knockout
Compatível com administração por transfecção
Variantes de Design
CRISPRs +/- HDRs
- Os gRNAs codificados pelo RGS4 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) e pelo RGS4 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h2) têm como alvo locais distintos dentro do locus RGS4. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
As construções doadoras HDR codificadas pelo RGS4 Plasmídeo HDR (h) e o Plasmídeo HDR RGS4 (h2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia RGS4 para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo RGS4 definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.