Plasmide Double Nickase (h) RBMX2: sc-412228-NIC

RBMX2 code une protéine liant l’ARN de la famille RBMX, impliquée dans la régulation post-transcriptionnelle, notamment l’épissage des pré-ARNm et d’autres événements de maturation de l’ARN qui déterminent le profil des isoformes de transcrits. Par ses interactions avec des complexes ribonucléoprotéiques et la machinerie du spliceosome, RBMX2 est en position d’influencer le contrôle co- et post-transcriptionnel de l’expression génique, avec des répercussions sur la progression du cycle cellulaire, le maintien du génome et les programmes de réponse au stress. Une régulation altérée des voies de maturation de l’ARN est une caractéristique récurrente de la transformation maligne et des troubles du développement, ce qui fait de RBMX2 une cible utile pour analyser comment des facteurs associés à l’épissage modulent les phénotypes cellulaires. RBMX2 humain est donc pertinent pour des études reliant les protéines liant l’ARN au couplage transcription–épissage et au remodelage du transcriptome associé aux maladies.

RBMX2 Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus RBMX2 dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de RBMX2. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de RBMX2. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.

Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de RBMX2.

Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.