Plasmide Double Nickase (m) RBM47: sc-434185-NIC
- Espèces cibles: mouse
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (m) RBM47 correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide RBM47 Double Nickase (m) et le plasmide RBM47 Double Nickase (m2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant Rbm47. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (m) RBM47 | sc-434185-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plasmide Double Nickase (m2) RBM47 | sc-434185-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
Rbm47 code la protéine à motif de liaison à l’ARN RBM47, un régulateur conservé de l’expression génique post‑transcriptionnelle qui se lie à des transcrits spécifiques pour influencer la stabilité des ARNm, leur localisation et l’épissage alternatif. Dans les cellules de souris, RBM47 contribue à des programmes de maturation de l’ARN qui façonnent la différenciation épithéliale et les réponses transcriptionnelles au stress, en s’articulant avec des voies plus larges du métabolisme de l’ARN, notamment celles impliquant des facteurs associés au spliceosome et la surveillance des ARN. Une activité de RBM47 altérée a été associée à une dérégulation de réseaux d’expression génique pertinents pour le développement et la plasticité épithélio‑mésenchymateuse, ce qui en fait un nœud utile pour étudier les mécanismes reliant la régulation de l’ARN aux transitions d’état cellulaire. Ces caractéristiques placent RBM47 comme une cible pertinente pour analyser comment les protéines liant l’ARN coordonnent le remodelage du transcriptome en physiologie normale et dans des contextes liés aux maladies.
RBM47 Le plasmide double nickase (m) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus Rbm47 dans les lignées cellulaires mouse. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de Rbm47. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de Rbm47. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de Rbm47.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.