Plásmido Doble Nickase (m) RBM47: sc-434185-NIC
- Especies Diana: mouse
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- El Plásmido Double Nickase (m)RBM47 consisten en un par de plásmidos cada uno codificando una nucleasa Cas9 mutada D10A y una guia de ARN de 20 nucleótidos (gRNA) diseñados para una mayor especificidad que el homologo CRISPR/Cas9 KO
- Las secuencias de gRNA tienen una diferencia de unas 20 pb para permitir un corte doble mediado por Cas9 en el ADN que imita el doble corte
- Uno de los plásmidos contiene el gen de resistencia a puromicina para la selección y el otro el marcado GFP para confirmar visualmente la transfección
- El plásmido de doble nickasa RBM47 (m) y el plásmido de doble nickasa RBM47 (m2) codifican diseños distintos de pares de gRNA dirigidos a Rbm47. Puede que esté disponible uno o ambos diseños
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
Plásmido Doble Nickase (m) RBM47 | sc-434185-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plásmido Doble Nickase (m2) RBM47 | sc-434185-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
Rbm47 codifica la proteína RBM47 con motivo de unión a ARN, un regulador conservado de la expresión génica postranscripcional que se une a transcritos específicos para influir en la estabilidad, la localización y el empalme alternativo del ARNm. En células de ratón, RBM47 contribuye a programas de procesamiento de ARN que moldean la diferenciación epitelial y las salidas transcripcionales sensibles al estrés, interactuando con vías más amplias del metabolismo del ARN que incluyen factores asociados al espliceosoma y la vigilancia del ARN. La actividad alterada de RBM47 se ha asociado con redes de expresión génica desreguladas relevantes para el desarrollo y la plasticidad epitelio-mesenquimal, lo que la convierte en un nodo útil para estudiar mecanismos que vinculan la regulación del ARN con transiciones de estado celular. Estas características sitúan a RBM47 como un objetivo relevante para dilucidar cómo las proteínas de unión a ARN coordinan la remodelación del transcriptoma en la fisiología normal y en contextos relevantes para la enfermedad.
RBM47 El plásmido de doble nicasa (m) consiste en un par de plásmidos emparejados diseñados para la edición de alta especificidad del locus Rbm47 en líneas celulares mouse. Cada plásmido expresa una nicasa Cas9 D10A y un ARN guía específico (sgRNA) dirigido a cadenas de ADN opuestas dentro de Rbm47. Cuando se dirigen a sitios adyacentes en cadenas de ADN opuestas, las dos nicasas generan cortes en cadena simple desplazados que, juntos, producen una rotura de doble cadena escalonada, lo que requiere una actividad coordinada sobre el objetivo por parte de ambas guías. La rotura de ADN resultante se resuelve mediante vías de reparación celular endógenas, más comúnmente a través de la unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que da lugar a inserciones o deleciones que alteran la función de Rbm47. Al requerir la participación de dos ARN guía en el locus diana, el enfoque de doble corte mejora la especificidad de la edición y proporciona una estrategia CRISPR complementaria para aplicaciones en las que se desea un control adicional sobre la precisión de la orientación.
Para facilitar la identificación eficiente de las células editadas, un plásmido codifica GFP para la visualización fluorescente de las poblaciones transfectadas, mientras que el plásmido complementario lleva un gen de resistencia a la puromicina para la selección con antibióticos. En conjunto, estas características facilitan el enriquecimiento eficiente de las poblaciones cotransfectadas y simplifican la validación de los clones con Rbm47 alterado.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.