RBM47 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (m): sc-434185

Descripción general

Rbm47 codifica RBM47, una proteína de unión a ARN que se asocia con transcritos para influir en la regulación génica postranscripcional, incluida la estabilidad del ARNm, el empalme (splicing) y los resultados de la edición de ARN. RBM47 se ha vinculado a la vía de edición de ARN dependiente de APOBEC1, que convierte citidina en uridina (C→U), contribuyendo a la diversificación de transcritos en contextos epiteliales y gastrointestinales. Mediante la modulación de programas de procesamiento de ARN, RBM47 puede afectar decisiones del estado celular como la diferenciación y la integridad epitelial, con conexiones descritas a firmas de expresión génica desreguladas en entornos relevantes para el cáncer y la inflamación. En sistemas murinos, la perturbación de Rbm47 ofrece una vía manejable para analizar el control centrado en el ARN de redes de señalización y la homeostasis tisular.

El plásmido CRISPR/Cas9 KO RBM47 (m) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen Rbm47 en líneas celulares mouse. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del Rbm47 junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.

El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de Rbm47 tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína RBM47.

Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en Rbm47 para la investigación de la señalización de RBM47, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.

Características principales

• sgRNA dirigidos a los exones de Rbm47 críticos para la función de RBM47
  Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
  Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
  Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de Rbm47 para mejorar la eficiencia del knockout
  Compatible con la administración mediante transfección

Variantes de diseño

CRISPRs +/- HDRs

• Los gRNA codificados por el plásmido RBM47 CRISPR/Cas9 KO (m) y el plásmido RBM47 CRISPR/Cas9 KO (m2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus Rbm47. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
  Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR RBM47 (m) y el plásmido HDR RBM47 (m2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología Rbm47 para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana Rbm47 definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.

Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.